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DC 如何收获   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2011-1-11 17:14 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
干细胞之家微信公众号
请问大家一个问题:树突状细胞培养7天后要收获,该采取哪种方法?是直接用PBS冲洗下来还是用胰酶消化后洗涤后收集?
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金话筒 优秀会员

沙发
发表于 2011-1-12 00:08 |只看该作者
细胞刮刀刮
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藤椅
发表于 2011-1-13 11:27 |只看该作者
回复 tangyvhuang 的帖子
% V- j7 v* X) a4 P- j5 Q) X; N) A0 x7 L* p
谢谢!

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板凳
发表于 2011-1-13 11:29 |只看该作者
回复 tangyvhuang 的帖子& T/ j+ t" [: v! P

* I7 g; D& d: L1 j: T0 J用细胞刮刀刮的话,会不会损伤细胞?
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报纸
发表于 2011-11-10 08:52 |只看该作者
4度盐水冲洗
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地板
发表于 2011-11-10 10:42 |只看该作者
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7楼
发表于 2011-11-10 10:52 |只看该作者
这个主要看你们采用实验室采用的分离工艺是否已经稳定,看不到白膜层的几率一般是多大?这个与离心机,离心参数还有血液的个体差异都有一定关系。
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8楼
发表于 2011-11-10 23:56 |只看该作者
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5 i0 H9 Y6 S# c+ E; l. V8 O6 |: N2 x% l
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9楼
发表于 2011-11-11 10:18 |只看该作者
胰酶确实作用不起来。物理的方法确实可以试试
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10楼
发表于 2011-11-11 14:33 |只看该作者
大致是以下步骤:
, b4 A$ w/ {  Q把培养液吸出
$ y+ ^% X6 Y1 ~8 t4 ~( O; s/ y3 n→加入适量生理盐水(75cm²培养瓶10ml左右)
5 L3 l2 P$ m; Q9 W→把培养瓶平放,来回摇晃几下2 ^1 Q' J# D) ]( U& C9 \( _( h8 M
→吸出盐水,重复以上步骤清洗2-3次. T5 _8 Y& l; T% ]
→加入适量生理盐水
* C& d- R  k0 u% k& J+ O→用移液管来回吹打细胞,使细胞脱落* f! k/ Z0 ~+ M
→平放培养瓶,用力拍打,再吹打→显微镜下观察  m1 _" j: p, ]% V7 f7 s
→拍打,吹打,观察
8 g! Y% F, w1 O→细胞全部脱落→…………
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