请问如何进行EB分化为三胚层后的鉴定，主要鉴定哪些标志

coralqin

刚想回复呢，仔细一看zerollx 贴出了本人以前发的一篇文章，惭愧:$

iyaofying888

非常好呀

牙牙丫丫123

呵呵，不错……
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zerollx

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三胚层的鉴别& d- F8 u" y; `( T
  1、形态学观察：ESC在不同的发育阶段有不同的形态，在11天时则出现典型的三胚层形态，可用相差显微镜观察。
) U3 N8 ?/ p) a( E. V, i. l  H7 ^1 q   2、三胚层中表达的特征蛋白的检测：免疫组化实验检测，EBs分化15d左右, 中胚层心肌细胞特异性标
1 N, g0 }5 @2 ?6 U志蛋白c TnT( 图9) , 外胚层特异性标志蛋白Nestin
7 L6 _) X1 k8 e0 u; [/ T 3、三胚层中标记基因的检测：在ESC发育各阶段提取总RNA,个标记基因的引物进行RT-PCR，电泳鉴定片段大小来检测是否有表达。* ]6 ~& u3 i7 K+ o; U3 p! y
     内胚层：特征性基因转甲状素蛋白、 甲胎蛋白在EBs 分化的初期不表达,从分化的第7d 起开始表达# c1 c/ M  f8 Z# [9 a* ]2 ^
    中胚层：波形蛋白等
* Z2 c/ ^: Y+ ]4 V) K% N    外胚层：巢蛋白等
3 ]4 d+ u# |* T3 R: D9 Z   具体你可以看这篇文章：体外分化过程中小鼠拟胚体的细胞学特征及基因表达模式