请问如何进行EB分化为三胚层后的鉴定，主要鉴定哪些标志

coralqin

刚想回复呢，仔细一看zerollx 贴出了本人以前发的一篇文章，惭愧:$

iyaofying888

非常好呀

牙牙丫丫123

呵呵，不错……
. {* `. w2 j9 B7 R, Y. P

zerollx

回复 牙牙丫丫123 的帖子
# K6 X: v% V3 e. V2 E" v: T# w7 C; f1 Q9 T& B: M5 P
三胚层的鉴别
0 C8 Y6 B' U- T3 j# U- g  1、形态学观察：ESC在不同的发育阶段有不同的形态，在11天时则出现典型的三胚层形态，可用相差显微镜观察。
# ]9 o. }. C% F   2、三胚层中表达的特征蛋白的检测：免疫组化实验检测，EBs分化15d左右, 中胚层心肌细胞特异性标
  E* L' n2 y, ?9 U, E+ ]: P. x志蛋白c TnT( 图9) , 外胚层特异性标志蛋白Nestin( {! a' W4 t6 ~6 h
3、三胚层中标记基因的检测：在ESC发育各阶段提取总RNA,个标记基因的引物进行RT-PCR，电泳鉴定片段大小来检测是否有表达。6 B; @7 \# C0 h7 \1 i
     内胚层：特征性基因转甲状素蛋白、 甲胎蛋白在EBs 分化的初期不表达,从分化的第7d 起开始表达9 j+ F+ B6 R9 X, l+ X
    中胚层：波形蛋白等
) i9 Z6 ~2 L" B8 |2 x& v% U$ Y! u    外胚层：巢蛋白等
  b! S- V' o! _# y8 t   具体你可以看这篇文章：体外分化过程中小鼠拟胚体的细胞学特征及基因表达模式