请问如何进行EB分化为三胚层后的鉴定，主要鉴定哪些标志

牙牙丫丫123

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请问如何进行EB分化为三胚层后的鉴定，主要鉴定哪些标志

zerollx

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5 ]$ \; O, t* h
0 Q3 n% D7 A1 c, z- b: t. ~三胚层的鉴别) I; ?: d% a9 m' b1 `
  1、形态学观察：ESC在不同的发育阶段有不同的形态，在11天时则出现典型的三胚层形态，可用相差显微镜观察。
2 H( A6 \5 c# K. G: s! i   2、三胚层中表达的特征蛋白的检测：免疫组化实验检测，EBs分化15d左右, 中胚层心肌细胞特异性标
* |; v7 ?3 H/ a) u志蛋白c TnT( 图9) , 外胚层特异性标志蛋白Nestin. Q6 ?" v/ z/ b7 n( }
3、三胚层中标记基因的检测：在ESC发育各阶段提取总RNA,个标记基因的引物进行RT-PCR，电泳鉴定片段大小来检测是否有表达。" ?5 k! {- A' U. p! |
     内胚层：特征性基因转甲状素蛋白、 甲胎蛋白在EBs 分化的初期不表达,从分化的第7d 起开始表达. Q; e/ X( i$ P2 Q3 q$ I' q
    中胚层：波形蛋白等0 @4 U# i  i9 V
    外胚层：巢蛋白等0 f# Z" p# l4 y. `- f1 P! [
   具体你可以看这篇文章：体外分化过程中小鼠拟胚体的细胞学特征及基因表达模式

牙牙丫丫123

呵呵，不错……
+ B% P- L& W% h4 r* g7 P; d5 ^$ y0 ^

iyaofying888

非常好呀

coralqin

刚想回复呢，仔细一看zerollx 贴出了本人以前发的一篇文章，惭愧:$

细胞海洋

回复 coralqin 的帖子4 K6 u+ J! L( e  f& p( o% y
) {- y& }+ d. ~
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jjjk127

好东西 ，学习:)

lp871

:D:D:D

shuishan

请教各位大牛：想做IPS向心肌细胞的诱导分化，请问形成EB后贴壁生长多久可见到心肌细胞，是不是可以见到心肌细胞跳动？上面说15天左右可检测到心肌细胞特异性标志蛋白c TnT，若想用分化的心肌细胞做下一步实验，是不是只要检测到了这种标志就可以了？怎样将其纯化了？好像心肌细胞是不可再生的，那这样分化得来的心肌细胞能否进行传代增殖呢？

细胞海洋

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