关于油红O染色

feiyang

请教大家！我做MSC诱导分化为脂肪细胞的油红O染色。1.在油红O加三蒸水3：2稀释后，没有通过定性滤纸，而是通过70um过滤篮过滤，然后静置，可是染色结果不好，看起来好多脂肪细胞并没有染上色，而且还是有不少杂质。2.一定要淡苏木复染吗？我没做。

chenchunlei

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- l( T  k5 S# g, ^8 _& Q0 [, Q在换成成脂诱导液第3-5天的时候，发现细胞开始出现漂浮，不知道什么原因

chenchunlei

回复 glysh 的帖子% [  |, d. t2 s
/ T- q$ _3 S* ]1 g* p9 @7 t/ T
用0.22的一次性滤膜可以过滤吗% K4 V  a) s  n. }9 v+ g

cyagen

如果没有中性滤纸，可以离心沉淀杂质；第一个固定步骤很重要，我们是用4%的中性甲醛固定30min。

细胞海洋

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黑夜的问候

细胞用中性甲醛固定时需要在4°条件下吗

myylovewp

回复 huangcong1988 的帖子% l% W9 D1 C& }$ Q0 C& p  n

5 ]2 }' C1 m9 t  o+ A我买的GIBCO的诱导分化试剂盒，成骨和成软骨结果很好，诱导成脂肪细胞貌似没观察到油滴（也不知道油滴到底啥样子）。在21d时用油红O染色，具体步骤是PBS洗，4%的多聚甲醛固定30min，水洗，油红工作液染色30min，水洗，观察。结果感觉没洗干净，上边有红黑的东西，貌似在细胞外。然后改进方法，染色后用60%的异丙醇漂洗，再用水清洗，感觉上边飘着黑黑的一层，也没染上颜色。我想请教一下，是我染色出问题了吗？

myylovewp

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3 Q8 G5 s! [* U) p, ?% g真的很抱歉，初次使用请多多包涵，谢谢版主的提点。

细胞海洋

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细胞海洋

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