关于油红O染色

feiyang

请教大家！我做MSC诱导分化为脂肪细胞的油红O染色。1.在油红O加三蒸水3：2稀释后，没有通过定性滤纸，而是通过70um过滤篮过滤，然后静置，可是染色结果不好，看起来好多脂肪细胞并没有染上色，而且还是有不少杂质。2.一定要淡苏木复染吗？我没做。

chenchunlei

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2 @* A  H6 r% t) n( \! X' E' E% k0 b
在换成成脂诱导液第3-5天的时候，发现细胞开始出现漂浮，不知道什么原因

chenchunlei

回复 glysh 的帖子  x6 o' o# Q3 j" a. ~4 I: F

2 Q( \% `+ b4 q用0.22的一次性滤膜可以过滤吗8 D. O: F, D9 ^! W' T0 E

cyagen

如果没有中性滤纸，可以离心沉淀杂质；第一个固定步骤很重要，我们是用4%的中性甲醛固定30min。

细胞海洋

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黑夜的问候

细胞用中性甲醛固定时需要在4°条件下吗

myylovewp

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' a) t6 n4 c3 S8 h# e* ]% [( g
4 l7 |' O$ [; r" `% ^. n我买的GIBCO的诱导分化试剂盒，成骨和成软骨结果很好，诱导成脂肪细胞貌似没观察到油滴（也不知道油滴到底啥样子）。在21d时用油红O染色，具体步骤是PBS洗，4%的多聚甲醛固定30min，水洗，油红工作液染色30min，水洗，观察。结果感觉没洗干净，上边有红黑的东西，貌似在细胞外。然后改进方法，染色后用60%的异丙醇漂洗，再用水清洗，感觉上边飘着黑黑的一层，也没染上颜色。我想请教一下，是我染色出问题了吗？

myylovewp

回复 细胞海洋 的帖子$ H8 n3 h! y6 C0 g3 \

1 W' b9 [. |5 z8 \& t2 B真的很抱歉，初次使用请多多包涵，谢谢版主的提点。

细胞海洋

回复 myylovewp 的帖子1 t) H* D  L0 B7 b1 @& Z6 B
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细胞海洋

回复 myylovewp 的帖子5 m. ~+ E( ?, Q- p. A5 t2 L. X

8 p! p! |$ H, P* R你回复谁 就点击对方回复帖子中的回复按钮 然后输入内容 像我这样9 B* Y5 ]7 T; m6 y

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