关于油红O染色

feiyang

请教大家！我做MSC诱导分化为脂肪细胞的油红O染色。1.在油红O加三蒸水3：2稀释后，没有通过定性滤纸，而是通过70um过滤篮过滤，然后静置，可是染色结果不好，看起来好多脂肪细胞并没有染上色，而且还是有不少杂质。2.一定要淡苏木复染吗？我没做。

chenchunlei

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在换成成脂诱导液第3-5天的时候，发现细胞开始出现漂浮，不知道什么原因

chenchunlei

回复 glysh 的帖子: q* a3 O- P9 L8 g

2 X8 P' f" X8 j# p  U4 p7 \4 U9 N用0.22的一次性滤膜可以过滤吗4 r" U5 Q" b( j

cyagen

如果没有中性滤纸，可以离心沉淀杂质；第一个固定步骤很重要，我们是用4%的中性甲醛固定30min。

细胞海洋

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黑夜的问候

细胞用中性甲醛固定时需要在4°条件下吗

myylovewp

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7 _9 J! w( K* V" k, V7 J1 K: N8 i% |2 R4 z, @$ |$ I
我买的GIBCO的诱导分化试剂盒，成骨和成软骨结果很好，诱导成脂肪细胞貌似没观察到油滴（也不知道油滴到底啥样子）。在21d时用油红O染色，具体步骤是PBS洗，4%的多聚甲醛固定30min，水洗，油红工作液染色30min，水洗，观察。结果感觉没洗干净，上边有红黑的东西，貌似在细胞外。然后改进方法，染色后用60%的异丙醇漂洗，再用水清洗，感觉上边飘着黑黑的一层，也没染上颜色。我想请教一下，是我染色出问题了吗？

myylovewp

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3 e* d- L9 l' `" J# A6 T' R
真的很抱歉，初次使用请多多包涵，谢谢版主的提点。

细胞海洋

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细胞海洋

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