CIK的高效扩增技术

realinter

CIK细胞的数量对最后应用的结果很重要，在起始细胞数量不高的情况下怎么能够将CIK高效扩增是一个技术难题：1 C* M+ b4 j# _+ M: E
现有的方法：: m8 ?* s( T7 Q- d" {
D0：IFN-r 1000u/ml
4 R( v7 D* r0 |8 r  _( ~2 kD1:  IL-2 1000u/ml+OKD3 100ng/ml, ^1 l8 A* m7 h0 a
以后每两天补充IL-2 。( ?+ Y% j2 e# s) s0 P% v
还有看到文章使用IL-1，IL-4等等的。
+ ?0 t, g2 U! u* N: x' V0 g谁有更好的方法，欢迎讨论！
2 l6 ]; P# U, k% J. ~3 g- k. ?

get0715

我知道的方法用的是CD3代替您说的OKD3。不好意思，您能告诉我一下OKD3是哪种因子么？

deron

回复 get0715 的帖子. ~0 k# w2 ?, x! @- m

- Q" k. R# [7 b$ a  kCD3又称OKD3* u3 K8 m5 r4 E6 ~  h2 B

deron

回复 realinter 的帖子' K" X' J; S: t3 B

4 f" a0 ^" T% Z+ Z  s3 p9 D多数文献报道说IL-2的量调至300U，也有介绍IL-1——100U/ml与IL-2——300U/ml共培养效果不错。就是没有实践过，不知道成效如何

yunshi503

改进的方法是用CD3包被培养瓶，然后再加入IFN-r、 IL-2 1000u/ml

realinter

回复 yunshi503 的帖子& t+ \9 R% W7 K
6 p: w$ }2 b" x# z
恩，看过相关的文献，那这个用CD3包被的瓶子是第一天用还是第二天用呢？6 G9 N$ K9 \: l9 ^) f) o# c
怎么去包被瓶子呢？能分享具体步骤吗？谢谢！

sky512829

回复 yunshi503 的帖子$ T4 _" r7 I2 P4 m* ]

" }& ~6 ?0 V2 V' r1 h$ N3 [这个方法可以，我正在用

sky512829

回复 realinter 的帖子
, N5 w( w& h- r% J- ]9 e3 v4 e2 }! g8 J. E  O( p$ W; U" |
瓶子一般包被过夜用，如果急用可以包被4个小时左右，用的时候，直接倒掉包被液，用PBS或生理盐水清洗一遍，再用培养液清洗一遍就可以把细胞加进去养了

sky512829

回复 realinter 的帖子
" C! r3 H5 H6 c8 A4 T1 X/ X4 A" g0 Y0 Q* E! z' V( c( R2 k- X, D
一般都是包被过夜第二天才用的，急用可以包被大概3,4个小时也可以了，用的时候倒掉包被液，20mlPBS洗一次，然后再用20ml培养基洗一次（175的瓶子）就可以直接加细胞养了

sky512829

回复 get0715 的帖子8 x  c( o) h% b

2 h* s7 C/ _9 M) P7 s3 O应该是叫OKT-3吧