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CIK的高效扩增技术  

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金话筒 帅哥研究员 博览群书 优秀版主

发表于 2011-2-21 16:09 |显示全部帖子
CIK细胞的数量对最后应用的结果很重要,在起始细胞数量不高的情况下怎么能够将CIK高效扩增是一个技术难题:# R6 ^1 L; |. l* E
现有的方法:
1 [1 d& ~. e* m* }( C2 iD0:IFN-r 1000u/ml# {( v6 s) Y( e# ]6 Y
D1:  IL-2 1000u/ml+OKD3 100ng/ml
& o8 u( R1 X5 x0 E* E以后每两天补充IL-2 。# m2 h  J& ~! ~5 f3 h0 o2 c$ P
还有看到文章使用IL-1,IL-4等等的。& K$ z3 ]9 m4 x
谁有更好的方法,欢迎讨论!* J% D3 q$ H  F1 [
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金话筒 优秀会员

发表于 2011-2-21 17:19 |显示全部帖子
我知道的方法用的是CD3代替您说的OKD3。不好意思,您能告诉我一下OKD3是哪种因子么?
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发表于 2011-2-21 20:20 |显示全部帖子
希瑞干细胞
回复 get0715 的帖子
* W, I* d. a, l3 K5 [
5 g1 J2 e- N0 H. ^3 bCD3又称OKD3
( i, P2 ]1 j' w
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发表于 2011-2-21 20:22 |显示全部帖子
干细胞之家微信公众号
回复 realinter 的帖子- G& J, D: j$ }* D- X. c8 ~
8 M9 z: y: P( |- M
多数文献报道说IL-2的量调至300U,也有介绍IL-1——100U/ml与IL-2——300U/ml共培养效果不错。就是没有实践过,不知道成效如何
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realinter + 2 + 5 谢谢讨论
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发表于 2011-2-22 22:42 |显示全部帖子
改进的方法是用CD3包被培养瓶,然后再加入IFN-r、 IL-2 1000u/ml
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realinter + 5 + 10 很帅的建议!
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金话筒 帅哥研究员 博览群书 优秀版主

发表于 2011-2-23 15:52 |显示全部帖子
回复 yunshi503 的帖子
* R! S$ Y9 }, q" `. W
, [- D% `! r  y" B6 L  O! F2 @恩,看过相关的文献,那这个用CD3包被的瓶子是第一天用还是第二天用呢?0 l4 b" L, S. c. y
怎么去包被瓶子呢?能分享具体步骤吗?谢谢!
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发表于 2011-3-3 16:17 |显示全部帖子
回复 yunshi503 的帖子
8 G% j) d3 h& g% x! X2 Y" |; w& F3 o* b8 _) W" }6 N; h2 E
这个方法可以,我正在用
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发表于 2011-3-3 16:19 |显示全部帖子
回复 realinter 的帖子
. M$ v$ p- P$ s; O$ \9 d& d# o' e3 |# X2 I* F0 C; x: |
瓶子一般包被过夜用,如果急用可以包被4个小时左右,用的时候,直接倒掉包被液,用PBS或生理盐水清洗一遍,再用培养液清洗一遍就可以把细胞加进去养了
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发表于 2011-3-3 16:22 |显示全部帖子
回复 realinter 的帖子
( p6 h( K4 @; d: g1 c9 A
2 X' l2 J# x5 A, g: t一般都是包被过夜第二天才用的,急用可以包被大概3,4个小时也可以了,用的时候倒掉包被液,20mlPBS洗一次,然后再用20ml培养基洗一次(175的瓶子)就可以直接加细胞养了
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发表于 2011-3-3 16:24 |显示全部帖子
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* f# u3 d  B  }
2 M! b. ^4 p; d5 p! T" [应该是叫OKT-3吧
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