CIK的高效扩增技术

realinter

CIK细胞的数量对最后应用的结果很重要，在起始细胞数量不高的情况下怎么能够将CIK高效扩增是一个技术难题：$ x" K2 o! r1 J  g$ a
现有的方法：7 a, C0 L/ m+ ?4 D% u- e1 D9 L9 u* P
D0：IFN-r 1000u/ml
* X9 s9 c6 @3 }: ]D1:  IL-2 1000u/ml+OKD3 100ng/ml
' c5 A  r/ O! w) C+ V% @2 K* T以后每两天补充IL-2 。- I+ D  p: X( ^; ?, L
还有看到文章使用IL-1，IL-4等等的。
! l- [4 v5 N+ g+ E: m' U2 u. W5 R谁有更好的方法，欢迎讨论！& R) g' V) h+ _3 u" \

get0715

我知道的方法用的是CD3代替您说的OKD3。不好意思，您能告诉我一下OKD3是哪种因子么？

deron

回复 get0715 的帖子. H" S6 N( d, t4 ?# x3 \! I  r

* Z+ Q  u% x9 `CD3又称OKD3
/ b* @; `. d$ i. j& P+ u

deron

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5 U- {/ m. m- K
5 N& c% T3 S% [多数文献报道说IL-2的量调至300U，也有介绍IL-1——100U/ml与IL-2——300U/ml共培养效果不错。就是没有实践过，不知道成效如何

yunshi503

改进的方法是用CD3包被培养瓶，然后再加入IFN-r、 IL-2 1000u/ml

realinter

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) `! s8 c, o% b- H* L6 C% Z) K
5 R' E3 A% |& |" W恩，看过相关的文献，那这个用CD3包被的瓶子是第一天用还是第二天用呢？+ T3 @; {  S1 s& z, K; C
怎么去包被瓶子呢？能分享具体步骤吗？谢谢！

sky512829

回复 yunshi503 的帖子3 E- k* F; t! u5 l- D
( E0 D. b7 N! X! T6 ?( o, a/ j
这个方法可以，我正在用

sky512829

回复 realinter 的帖子) u6 E" o2 v! O# }' Z! H

$ [8 m4 W' c- h" g8 P; M瓶子一般包被过夜用，如果急用可以包被4个小时左右，用的时候，直接倒掉包被液，用PBS或生理盐水清洗一遍，再用培养液清洗一遍就可以把细胞加进去养了

sky512829

回复 realinter 的帖子/ v. }! N; r8 A" i

  g7 @( B2 u  v1 A一般都是包被过夜第二天才用的，急用可以包被大概3,4个小时也可以了，用的时候倒掉包被液，20mlPBS洗一次，然后再用20ml培养基洗一次（175的瓶子）就可以直接加细胞养了

sky512829

回复 get0715 的帖子, l8 @  @0 y5 [' l
8 D! s5 m+ j& B& ?. r7 \. W
应该是叫OKT-3吧