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CIK的高效扩增技术   [复制链接]

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金话筒 帅哥研究员 博览群书 优秀版主

楼主
发表于 2011-2-21 16:09 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
干细胞之家微信公众号
CIK细胞的数量对最后应用的结果很重要,在起始细胞数量不高的情况下怎么能够将CIK高效扩增是一个技术难题:
; {9 {4 M6 v& [现有的方法:
1 z. \8 h7 V4 z' QD0:IFN-r 1000u/ml
" X/ E2 n6 l5 p* o% k2 hD1:  IL-2 1000u/ml+OKD3 100ng/ml
& p8 c7 V! e! r2 R+ F; w, `9 m以后每两天补充IL-2 。3 B1 g  h$ I9 I6 W- e
还有看到文章使用IL-1,IL-4等等的。! g' _9 r3 k$ p; b
谁有更好的方法,欢迎讨论!
+ J* ^" b( B! [8 f1 {4 p1 s
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金话筒 优秀会员

沙发
发表于 2011-2-21 17:19 |只看该作者
我知道的方法用的是CD3代替您说的OKD3。不好意思,您能告诉我一下OKD3是哪种因子么?
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藤椅
发表于 2011-2-21 20:20 |只看该作者
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3 }0 s9 Q6 r, T5 }8 r! Y7 B: P: J( V5 W! Q/ [9 ^' z; a
CD3又称OKD3
, ?8 x. k4 A3 ^- Y; k
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板凳
发表于 2011-2-21 20:22 |只看该作者
回复 realinter 的帖子
$ n- e' s! K* j& T/ P4 I* k2 Q, |8 I; ~* `" O4 X" c- q" ?" I
多数文献报道说IL-2的量调至300U,也有介绍IL-1——100U/ml与IL-2——300U/ml共培养效果不错。就是没有实践过,不知道成效如何
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realinter + 2 + 5 谢谢讨论
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报纸
发表于 2011-2-22 22:42 |只看该作者
改进的方法是用CD3包被培养瓶,然后再加入IFN-r、 IL-2 1000u/ml
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realinter + 5 + 10 很帅的建议!
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金话筒 帅哥研究员 博览群书 优秀版主

地板
发表于 2011-2-23 15:52 |只看该作者
回复 yunshi503 的帖子
! l( F# v% E/ L7 t9 V' Z. R' T7 ^) S+ w
恩,看过相关的文献,那这个用CD3包被的瓶子是第一天用还是第二天用呢?9 w3 E3 S. z' j
怎么去包被瓶子呢?能分享具体步骤吗?谢谢!
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7楼
发表于 2011-3-3 16:17 |只看该作者
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5 A2 [) y. p" l* \5 i$ E, t  h- A% J
! c, x/ T8 j1 T0 v  b* r这个方法可以,我正在用
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发表于 2011-3-3 16:19 |只看该作者
回复 realinter 的帖子
4 L$ Q) f- ~) `% {9 y( e
  z1 c% O# ^6 z$ Y0 v- A: t瓶子一般包被过夜用,如果急用可以包被4个小时左右,用的时候,直接倒掉包被液,用PBS或生理盐水清洗一遍,再用培养液清洗一遍就可以把细胞加进去养了
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发表于 2011-3-3 16:22 |只看该作者
回复 realinter 的帖子
7 }$ L! B9 g/ v1 u0 @9 a% `- ]/ c7 r1 E" s6 n
一般都是包被过夜第二天才用的,急用可以包被大概3,4个小时也可以了,用的时候倒掉包被液,20mlPBS洗一次,然后再用20ml培养基洗一次(175的瓶子)就可以直接加细胞养了
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发表于 2011-3-3 16:24 |只看该作者
回复 get0715 的帖子/ W% r9 ?% \$ }) E6 o4 G8 Z2 J7 y

1 V, f# k% V7 t应该是叫OKT-3吧
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