CIK的高效扩增技术

realinter

CIK细胞的数量对最后应用的结果很重要，在起始细胞数量不高的情况下怎么能够将CIK高效扩增是一个技术难题：% J, j3 |0 L& ~& o$ K+ ~; Q
现有的方法：! W! v9 {, s6 e, f% D
D0：IFN-r 1000u/ml2 Z0 v- Z2 L, w
D1:  IL-2 1000u/ml+OKD3 100ng/ml
; F3 a: |, U, {4 [( d5 L以后每两天补充IL-2 。
: C" B, P7 ~! m* d# B' e7 R; G3 k还有看到文章使用IL-1，IL-4等等的。
1 j4 T* @$ g7 C) x3 _) O谁有更好的方法，欢迎讨论！
0 d# N( P/ i9 B" }  H/ _0 I* X+ h

get0715

我知道的方法用的是CD3代替您说的OKD3。不好意思，您能告诉我一下OKD3是哪种因子么？

deron

回复 get0715 的帖子) q/ M& }* M% z+ v
9 |  E4 O* e8 _
CD3又称OKD3. e, y. O' ]0 W* v, j

deron

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. p/ B; j" P' ^, w8 j0 k" [, n4 X' W* @6 ]
多数文献报道说IL-2的量调至300U，也有介绍IL-1——100U/ml与IL-2——300U/ml共培养效果不错。就是没有实践过，不知道成效如何

yunshi503

改进的方法是用CD3包被培养瓶，然后再加入IFN-r、 IL-2 1000u/ml

realinter

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/ ?: X, i2 [$ q+ k" [6 ?, m" Y  \- ?  r0 w; c. U! R; h
恩，看过相关的文献，那这个用CD3包被的瓶子是第一天用还是第二天用呢？
# d$ W1 q3 B0 q' S5 K怎么去包被瓶子呢？能分享具体步骤吗？谢谢！

sky512829

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# v" k4 }+ `9 D" C% c
6 U2 h/ d, k& I' _: F" _' i& d这个方法可以，我正在用

sky512829

回复 realinter 的帖子+ ~9 f1 n; [. M/ t: s
: r% P$ u( H$ `' V
瓶子一般包被过夜用，如果急用可以包被4个小时左右，用的时候，直接倒掉包被液，用PBS或生理盐水清洗一遍，再用培养液清洗一遍就可以把细胞加进去养了

sky512829

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* J: n: ?& `$ x2 Q; r
一般都是包被过夜第二天才用的，急用可以包被大概3,4个小时也可以了，用的时候倒掉包被液，20mlPBS洗一次，然后再用20ml培养基洗一次（175的瓶子）就可以直接加细胞养了

sky512829

回复 get0715 的帖子5 I6 ^% H3 a3 b; d! R

% b4 i4 [. _( }4 V" L* L应该是叫OKT-3吧