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CIK的高效扩增技术   [复制链接]

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金话筒 帅哥研究员 博览群书 优秀版主

楼主
发表于 2011-2-21 16:09 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
干细胞之家微信公众号
CIK细胞的数量对最后应用的结果很重要,在起始细胞数量不高的情况下怎么能够将CIK高效扩增是一个技术难题:
  f4 v, U" V' v# }现有的方法:1 h4 f6 y' J/ ^. n0 v+ y
D0:IFN-r 1000u/ml
% f) Q2 y) k: w; t/ g6 b- bD1:  IL-2 1000u/ml+OKD3 100ng/ml
4 }% Z9 O2 F6 \+ A, S以后每两天补充IL-2 。  R( g/ Y+ i! Y3 V0 c
还有看到文章使用IL-1,IL-4等等的。) X' `  X  M) d7 n' z( x7 v7 x' Z
谁有更好的方法,欢迎讨论!
: V& L( i9 k2 u* c5 q1 l6 Q
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沙发
发表于 2011-2-21 17:19 |只看该作者
我知道的方法用的是CD3代替您说的OKD3。不好意思,您能告诉我一下OKD3是哪种因子么?
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藤椅
发表于 2011-2-21 20:20 |只看该作者
回复 get0715 的帖子
7 H7 H! b: @! t) @/ k
; g" ?& g# o1 d  q& E# oCD3又称OKD3' E* V0 F6 M$ @4 F
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板凳
发表于 2011-2-21 20:22 |只看该作者
回复 realinter 的帖子
) F$ k: x: ?+ B
9 l. ^! B- o% G多数文献报道说IL-2的量调至300U,也有介绍IL-1——100U/ml与IL-2——300U/ml共培养效果不错。就是没有实践过,不知道成效如何
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realinter + 2 + 5 谢谢讨论
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报纸
发表于 2011-2-22 22:42 |只看该作者
改进的方法是用CD3包被培养瓶,然后再加入IFN-r、 IL-2 1000u/ml
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realinter + 5 + 10 很帅的建议!
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地板
发表于 2011-2-23 15:52 |只看该作者
回复 yunshi503 的帖子
, @9 j5 {0 f0 E# Z# i9 X/ q/ X
- i8 C0 @5 b" {) L  Q: A恩,看过相关的文献,那这个用CD3包被的瓶子是第一天用还是第二天用呢?
7 ]% w2 C. l7 x怎么去包被瓶子呢?能分享具体步骤吗?谢谢!
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发表于 2011-3-3 16:17 |只看该作者
回复 yunshi503 的帖子
1 \) g/ P1 d9 H1 B' m( D2 F% k. \# N; x' a
这个方法可以,我正在用
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发表于 2011-3-3 16:19 |只看该作者
回复 realinter 的帖子
+ l: c: z- I/ }; K+ m- ^( r; }
" V1 \( E4 n6 ^0 A9 v瓶子一般包被过夜用,如果急用可以包被4个小时左右,用的时候,直接倒掉包被液,用PBS或生理盐水清洗一遍,再用培养液清洗一遍就可以把细胞加进去养了
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发表于 2011-3-3 16:22 |只看该作者
回复 realinter 的帖子* B1 w7 {/ q7 q9 u7 N$ a2 e# k0 F

" k0 i6 t3 h7 h一般都是包被过夜第二天才用的,急用可以包被大概3,4个小时也可以了,用的时候倒掉包被液,20mlPBS洗一次,然后再用20ml培养基洗一次(175的瓶子)就可以直接加细胞养了
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发表于 2011-3-3 16:24 |只看该作者
回复 get0715 的帖子  l+ x: M1 n$ }# U* Y& v; d

% a5 y% Z* L1 r应该是叫OKT-3吧
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