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CIK的高效扩增技术   [复制链接]

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金话筒 帅哥研究员 博览群书 优秀版主

楼主
发表于 2011-2-21 16:09 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
干细胞之家微信公众号
CIK细胞的数量对最后应用的结果很重要,在起始细胞数量不高的情况下怎么能够将CIK高效扩增是一个技术难题:
' E$ o4 U4 F2 Z% H' B* N4 d现有的方法:8 N% r( r- Y2 Q7 n$ W$ c
D0:IFN-r 1000u/ml8 T9 `2 M- Y# J2 J' j; a
D1:  IL-2 1000u/ml+OKD3 100ng/ml
4 @) h7 h/ b0 Y; D6 z! H6 B以后每两天补充IL-2 。
" \/ S; k( N6 ~7 i还有看到文章使用IL-1,IL-4等等的。, y# Q& s$ G* ~/ S- l" |8 d# e
谁有更好的方法,欢迎讨论!- H+ b+ |" w3 g% u1 q0 r
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金话筒 优秀会员

沙发
发表于 2011-2-21 17:19 |只看该作者
我知道的方法用的是CD3代替您说的OKD3。不好意思,您能告诉我一下OKD3是哪种因子么?
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藤椅
发表于 2011-2-21 20:20 |只看该作者
回复 get0715 的帖子- ^% W& c/ K( B( {

4 b3 b# X+ [0 r2 }6 M4 i( s  ~# kCD3又称OKD3/ l$ m, I4 k4 p# d6 G  h$ u
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板凳
发表于 2011-2-21 20:22 |只看该作者
回复 realinter 的帖子( ~/ M& t; a. g% @& |, S- M! a. g/ b

0 w$ ~3 [1 s5 J多数文献报道说IL-2的量调至300U,也有介绍IL-1——100U/ml与IL-2——300U/ml共培养效果不错。就是没有实践过,不知道成效如何
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报纸
发表于 2011-2-22 22:42 |只看该作者
改进的方法是用CD3包被培养瓶,然后再加入IFN-r、 IL-2 1000u/ml
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realinter + 5 + 10 很帅的建议!
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金话筒 帅哥研究员 博览群书 优秀版主

地板
发表于 2011-2-23 15:52 |只看该作者
回复 yunshi503 的帖子4 t, ?- C2 z& W' _" H: R
$ V4 s( a' L4 R' P* n3 G" z2 W
恩,看过相关的文献,那这个用CD3包被的瓶子是第一天用还是第二天用呢?
: c/ E& Y- \) a3 M4 t8 h4 r5 S怎么去包被瓶子呢?能分享具体步骤吗?谢谢!
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7楼
发表于 2011-3-3 16:17 |只看该作者
回复 yunshi503 的帖子1 i" d- M* R! A
! H; O2 H  V( ^7 i4 h
这个方法可以,我正在用
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8楼
发表于 2011-3-3 16:19 |只看该作者
回复 realinter 的帖子
9 e$ R; Z: g# ]! t5 T8 x5 a
: D; d) R2 i; g8 p3 `& C8 ~瓶子一般包被过夜用,如果急用可以包被4个小时左右,用的时候,直接倒掉包被液,用PBS或生理盐水清洗一遍,再用培养液清洗一遍就可以把细胞加进去养了
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9楼
发表于 2011-3-3 16:22 |只看该作者
回复 realinter 的帖子7 ]- l7 @4 g- [4 b' f

& T& b) o2 y8 L: d" q一般都是包被过夜第二天才用的,急用可以包被大概3,4个小时也可以了,用的时候倒掉包被液,20mlPBS洗一次,然后再用20ml培养基洗一次(175的瓶子)就可以直接加细胞养了
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10楼
发表于 2011-3-3 16:24 |只看该作者
回复 get0715 的帖子
" P5 |, Y3 b$ _: r$ Q' m" @' R
+ e! z. }, }- F应该是叫OKT-3吧
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