求Hela细胞成球培养条件

amosummer

请问Hela细胞可以进行成球培养？是否需要先在普通DMEM培养基里培养一段时间？如果是的话，在细胞达到多少覆盖率可以更换无血清悬浮培养基？希望各位不吝赐教！

深海寂寞鱼

回复 Tim 的帖子
& h8 m8 E% k+ @0 |  I* ^$ p, J
9 E( Y0 v6 N0 z! c- i
! i  f4 V- M7 `6 N  你可以尝试文献中使用较多的：（DMEM/F12 + B27 ＋ EGF  +  bFGF）无血清培养条件

深海寂寞鱼

回复 lxn90219 的帖子
) {0 M# z1 h, T
% c; ]- L6 E/ u/ r) c6 }3 [; P2 t, t6 b4 E
  To lxn90219 ：& B1 M' f. G0 l2 f! T& q" T
* J$ D1 ^! {, D5 t: r; R
  不知道你是看到哪些文献中使用HeLa进行Tumorsphere Formation assay的？可信度是否很高？
; i: v! _8 ~' e3 q( R
# m& t' R: b2 r4 C   如果你特别想进行这个实验，可以按照文献中的方法试试看。' C: q' y6 a8 _6 ]4 g

( K+ M5 h& }( Q6 R    我个人不是太推荐。

Tim

回复 深海寂寞鱼 的帖子4 ?) j4 J! Z5 p+ T! o+ q- s
+ s+ G% t: E3 F- i- F" _6 Q1 ]7 Q( N
C33A培养基的基本成分你知道吗？？( e. p7 s: D# E/ ]' R

Tim

回复 amosummer 的帖子( f6 r' h& |. \( \1 H  ~" @8 D6 n7 s
6 [& l5 `9 j& J  O- b# H
共同努力吧！我也正在搞粘膜细胞的成球培养！现在细胞是成单个的球体，可见二分裂，但是细胞增殖很慢！正在寻找突破口呢！我用的是我自己配的无血清培养基！

lxn90219

回复 深海寂寞鱼 的帖子' p+ F$ q/ x, f/ e2 [

* U( E' w* ^4 R) D我现在也要用hela做，很多文献说能做出来了，到底能不能用 hela 跪求

深海寂寞鱼

to Rena：9 o. S  k5 K/ s; W8 S& k/ M( m
9 q' W; T+ m! Y; u
    个人建议：$ V( K! b- T: C2 {
" ^6 }( ]$ o2 @1 j; B$ S6 A
    1. 首先搞清楚你所用的细胞系本身是否符合干细胞模型，不然无论你做什么都是浮云。- ]3 l- P3 u% g/ {9 v7 h( ~, T. j0 I

7 Z% K) }8 o& m' ]8 m: Z      （原因是不是每个细胞系就能拿来做肿瘤干细胞相关实验）
( ~2 E4 q) I) V% [8 [: x: ?
/ m' S3 M. l9 ^$ y% v       尽量多查文献。尽量要有影响因子在5分以上的文献支持。
. D6 ?& b( g7 r. R& c% z, t* S8 o4 p) p7 n% |: n
    2.  采用化疗药物富集CSC不失为一个方法，但本身有很多不容易实现的问题。
" O1 |& L& f' h" m
( p9 p; G( w( O         i.  用哪种化疗药物才能杀死非肿瘤干细胞，而尽量让肿瘤干细胞活下来？
; @8 ^: X6 L2 M" [5 C& Q( X3 O" j2 }* y+ s8 D' A. x& ^
         ii. 这种药物用多大浓度合适？需要作用多长时间？# F+ L3 [1 t0 @; ]1 h4 R5 f: K6 ^

; h- P( R( F; A5 _# A. u2 w         iii. 肿瘤细胞经过化疗药物作用后，是否还能保留其parental细胞的特性？8 `7 i) ~0 r6 r- ]- B, z

5 [4 C0 p; M: U4 I3 R5 l         这些问题都是需要你探索的。要么就要有现成的参考文献。
2 ]* l' m; K! t- q- S: l2 x* u: ~' C* m( A6 g2 y# U' z% n! P9 E
祝实验顺利。

Rena

回复 深海寂寞鱼 的帖子
- d/ a/ l% K( Y9 S! J# q. B6 U, P+ Z$ _: v" n
谢谢，现在实验是采取化疗药物杀伤细胞富集CSC后诱导，结果很不理想，继续探索中。。。再次感谢\(^o^)/~

深海寂寞鱼

回复 Rena 的帖子
  x. U8 {  D$ A3 _! s6 R
+ P, k9 F0 C% X$ k) S* l' tto Rena:
8 e! [3 a& o0 j% n9 i1 G7 ~! J: M3 G
    肝癌细胞株BEL-7402 、HepG2确实没有直接经验，不敢给你乱说。
% t% f( ]+ ~# k& W! W
4 W: F& S+ m/ j+ T5 E    但是Hep3B是可以在无血清培养基里形成肿瘤球。+ A. j. Y6 R# J8 M

7 R" A' c/ M" e( l    欢迎继续交流，共同进步。

深海寂寞鱼

回复 Rena 的帖子
  ?' h" p* A; {- s4 w+ B
% x: ~" o* @& zto Rena:
! u2 N) T) O7 H4 Z) O( @5 I8 y) x' b* e
    肝癌细胞株BEL-7402 、HepG2确实没有直接经验，不敢给你乱说。
5 c5 w* h9 P- l! n. ^0 Y/ |( G
    但是Hep3B是可以在无血清培养基里形成肿瘤球。% Z! y* G9 @: b8 A+ H. p

+ b9 `3 W' L9 @6 l( {    欢迎继续交流，共同进步。