设计测序引物有什么要求？sense primer和antisense primer 都是要成对吗？ - 实验室综合讨论区干细胞之家



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查看: 287872\|回复: 13	go [请教] 设计测序引物有什么要求？sense primer和antisense primer 都是要成对吗？ [复制链接]

军医

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楼主

发表于 2011-3-19 00:36 |只看该作者 |正序浏览 |打印

primer 5设计时要选sense primer 和antisense primer或 both ，这有什么区别吗？

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14楼

发表于 2012-5-8 14:54 |只看该作者

回复军医的帖子

不管你是是PCR扩出的片段还是合成的片段，只要你插入载体，就可用该载体的通用引物测序

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p1988

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13楼

发表于 2012-5-8 14:19 |只看该作者

我也想知道测序引物的要求，回复看看

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buwenlu

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12楼

发表于 2012-5-8 13:09 |只看该作者

回复狮子头人的帖子2 Q  e/ @" V( r5 b/ X2 p0 s3 `# t
% n6 R0 p  c' ~( }2 X- O$ y
同意，短序列就可以单向测得啊1 B# E4 L9 X" ?  C1 @

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王乾

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11楼

发表于 2011-10-18 12:27 |只看该作者

回复狮子头人的帖子; A& V& [/ R2 s; N' a2 Y9 n

不同意，理论上拿一条引物P只能往一个方向延伸，产生一个单链，和效率无关

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狮子头人

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10楼

发表于 2011-10-17 19:43 |只看该作者

回复王乾的帖子, r/ t% t: Y# \& W5 u

不会是无限长吧？3 _8 ?8 o, _ u9 [0 b8 ?
只不过是扩增效率变得很慢而已？不知道您同意不！

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王乾

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9楼

发表于 2011-3-25 17:34 |只看该作者

任何PCR引物都需要成对纯在的，因为PCR的过程始终是以DNA单链为模板，以其中的一条引物为其实，沿着5‘到3’的方向进行的，设想一下如果只是一条引物，那么生成的DNA产物长度将没有限制，换句话说就是无限长，所以引物设计时一定是根据你产物的情况来确定引物的位置，设计一对引物对着P,这样才能得到想要的产物。