人骨髓间充质干细胞原代培养：求鉴定，有图（每日更新）

柏林小杨

图片好黑啊，看不见啊

HMC

接种密度太低

athena1988620

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2 Q) Y# M& m* b1 R) R0 u0 D& L: U8 \3 S+ B
呵呵  不用羡慕 做人的太麻烦了 得经常往临床跑 标本也比较珍贵，我后来试了几次大鼠的 ，也试了全骨髓培养，感觉全骨髓培养的细胞状态貌似比较好，而且多洗几次也挺干净的  呵呵 谢谢你的建议  

飞翔的十字架

好羡慕能做原代人的间充质的啊 ( k. s$ r' V/ p

  W4 y" N" W1 i: Q( U) U根据我的经验来说说吧：
: F& Q7 D5 L- |3 i/ b3 S1.根据照片基本没有贴壁细胞吧! ^" X- S) a0 ~- i; a, K+ `4 Z
2.不能就说失败了，根据Friedenstein当时的结论，每个集落都市有一个细胞发展而来的，那么只要有一个间充质细胞贴壁，就有可能得到大量的细胞；我在大鼠原代的时候就有这样的情况，3天都没有看见贴壁细胞，但是再放个1周 居然发现长起来了* f/ K. v1 d% `# P
3.如果是初学者，又没有人带着做，我建议还是先用全骨髓法比较好。间充质在骨髓的比例很小（Friedenstein说是百万分之一）用percoll肯定会顺损失细胞，也有一定毒性。用全骨髓法线养出细胞，先得到些培养的经验和信心更好

Learner

我们实验室就用骨髓直接贴壁法，养的也挺好。

透明微笑

没有看到细胞

clairezy1983

很有可能你在离心后去上清的时候把细胞也倒掉了，随着血细胞一起倒出去了，下一次慢点啊！我有一次做脂肪来源的MSC就是这样的，细胞都被倒掉了。然后剩下的长出来就像你发的图片那样！！

dyg108

从图片上看好像是没有找到细胞层面，而是瓶子的外层，注意调一下，也许不是失败

一一

看似照相时图片选层错误，细胞量太少，即使有间充质也较困难形成集落，只能保持耐心，建议下次做原代提高细胞接种量，控制换液时间，如果难以贴壁，可以加些贴壁的因子，或者处理培养瓶，不要急于求成，有些时候你认为可能不行了，谁知过些天长了起来，俗称的别太给力。那些黑点怀疑是培养基的杂质。

luoziwei

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6 g  R; d, J: _& s& Y1 T增加骨髓液的体积再离心