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慢病毒载体上一般会有tet抗性基因，可以通过Dox筛选？
( e4 Q% w4 e4 J! K# mDox怎么开启外源基因表达的呢?- b% `, f4 H8 U. x1 o: q
pTet-On基因表达系统是1992年Gossen等设计的一种受四环素调控外源基因表达的高效真核表达体系，该系统有两种表达质粒即调节质粒和反应质粒组成,
' \ S; b4 Y" s调节质粒可表达一种融合蛋白称四环素反应转录活化因子(Tetresponsivetranscriptionalactivator,tTA), 该因子可与反应转录的四环素反应性元件(Tetresponsiveelement,TRE)结合。: V( ^1 J: b* Q. w# w* W3 o
在没有四环素(tetracycline)或其衍生物强力霉素存在的情况下, 引起插入启动子下游目的基因的高效表达。/ k2 S% O; {* z& p3 x- k0 @( f
pTet-Off，相反，随着四环素浓度的增加, 基因的表达以一种剂量依赖性的方式逐渐关闭直至为零。
; [* L2 x% O% y4 [% {+ u! n: z诱导倍数按下列公式计算:诱导倍数=+Dox/-Dox诱导倍数>20者为高表达克隆。2 a7 c z( z, ]! E; E* g
' q! U$ Z6 f& u3 i4 m/ S5 s
6 k1 N# J- M2 D, V) d" v) z7 n最近看了一篇文献（Matthias Stadtfeld.Induced Pluripotent Stem Cells Generated Without Viral Integration,science,2008），利用的似乎不是利用病毒载体做的，而是利用Oct4-IND的等位基因可诱导转录激活做的，很迷惑，求解答。 |
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发表于 2011-4-11 16:25
发表于 2013-11-27 23:18
