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gact

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楼主

发表于 2011-4-11 16:25 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

DOx诱导的病毒载体是如何作用的
看到有文献中利用DOX药物开启、关闭病毒载体中转录因子的表达；( ]2 L! G# r) y" h* G/ S8 ?
甚至可以用DOX一直持续诱导病毒载体携带的转录因子的表达。
是不是这个载体游离于细胞染色体外？并且能够在宿主细胞中持续自我复制？0 q' D2 c2 r( ]" O. E

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沙发

发表于 2011-4-11 21:12 |只看该作者

关注，我下一步也要用到DOX。

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64627675

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藤椅

发表于 2011-4-11 22:47 |只看该作者

楼主随意搜索一下就应该有很多相关介绍的，我们平时经常用，反正根据需要嘛，看载体是TET-ON还是TET-OFF，需要的时候根据DOX的有效工作浓度换算一下，加进去，就可以起到开或关的作用，体外实验好控制，体内的话就要查文献或自己测试了

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gact

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板凳

发表于 2011-4-12 11:11 |只看该作者

慢病毒载体上一般会有tet抗性基因，可以通过Dox筛选？
Dox怎么开启外源基因表达的呢?; D. F  w' {9 ?; ~
pTet-On基因表达系统是1992年Gossen等设计的一种受四环素调控外源基因表达的高效真核表达体系，该系统有两种表达质粒即调节质粒和反应质粒组成,   Q0 [$ p+ Z6 q: u- k% F
调节质粒可表达一种融合蛋白称四环素反应转录活化因子(Tetresponsivetranscriptionalactivator,tTA), 该因子可与反应转录的四环素反应性元件(Tetresponsiveelement,TRE)结合。; L# ?) l. o0 k, F
在没有四环素(tetracycline)或其衍生物强力霉素存在的情况下, 引起插入启动子下游目的基因的高效表达。
pTet-Off，相反，随着四环素浓度的增加, 基因的表达以一种剂量依赖性的方式逐渐关闭直至为零。) A3 ?1 z1 a) F: Q  B
诱导倍数按下列公式计算:诱导倍数=+Dox/-Dox诱导倍数>20者为高表达克隆。
% B( Z" I8 [# L' R+ Q" m
( |2 v/ _, N1 B( e, J4 W( Y
最近看了一篇文献（Matthias Stadtfeld.Induced Pluripotent Stem Cells Generated Without Viral Integration,science,2008），利用的似乎不是利用病毒载体做的，而是利用Oct4-IND的等位基因可诱导转录激活做的，很迷惑，求解答。

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