DOx诱导的病毒载体是如何作用的 - ips专区干细胞之家



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gact

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楼主

发表于 2011-4-11 16:25 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

DOx诱导的病毒载体是如何作用的! }' L1 u% u) H7 |, F( N$ Q4 q
看到有文献中利用DOX药物开启、关闭病毒载体中转录因子的表达；
甚至可以用DOX一直持续诱导病毒载体携带的转录因子的表达。
是不是这个载体游离于细胞染色体外？并且能够在宿主细胞中持续自我复制？ P+ Q+ |" m8 A' z v+ q5 W. j/ \

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沙发

发表于 2011-4-11 21:12 |只看该作者

关注，我下一步也要用到DOX。

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64627675

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藤椅

发表于 2011-4-11 22:47 |只看该作者

楼主随意搜索一下就应该有很多相关介绍的，我们平时经常用，反正根据需要嘛，看载体是TET-ON还是TET-OFF，需要的时候根据DOX的有效工作浓度换算一下，加进去，就可以起到开或关的作用，体外实验好控制，体内的话就要查文献或自己测试了

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gact

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板凳

发表于 2011-4-12 11:11 |只看该作者

慢病毒载体上一般会有tet抗性基因，可以通过Dox筛选？! C% m' O4 t" M |. C2 X* Z1 v
Dox怎么开启外源基因表达的呢?( U" u# J. o- }% T
pTet-On基因表达系统是1992年Gossen等设计的一种受四环素调控外源基因表达的高效真核表达体系，该系统有两种表达质粒即调节质粒和反应质粒组成, ' s' i P3 Z4 w) Z7 A
调节质粒可表达一种融合蛋白称四环素反应转录活化因子(Tetresponsivetranscriptionalactivator,tTA), 该因子可与反应转录的四环素反应性元件(Tetresponsiveelement,TRE)结合。% o. |8 I2 V2 [0 q5 l# g% g
在没有四环素(tetracycline)或其衍生物强力霉素存在的情况下, 引起插入启动子下游目的基因的高效表达。, o9 @8 A8 W: {+ H
pTet-Off，相反，随着四环素浓度的增加, 基因的表达以一种剂量依赖性的方式逐渐关闭直至为零。
诱导倍数按下列公式计算:诱导倍数=+Dox/-Dox诱导倍数>20者为高表达克隆。

最近看了一篇文献（Matthias Stadtfeld.Induced Pluripotent Stem Cells Generated Without Viral Integration,science,2008），利用的似乎不是利用病毒载体做的，而是利用Oct4-IND的等位基因可诱导转录激活做的，很迷惑，求解答。

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