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楼主: idealgas
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[请教] 电转染牛成纤维细胞的问题   [复制链接]

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9楼
发表于 2011-4-17 10:11 |只看该作者
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回复 idealgas 的帖子( g- G4 l/ k' _; G6 d! e4 s6 H& G

$ N( V# D% ^5 }2 J$ w6 i% d0 [3 ~/ p4 q可以下载 不要使用迅雷

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8楼
发表于 2011-4-16 22:46 |只看该作者
既然你排除了上述几种因素,那就试试低糖培养液
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7楼
发表于 2011-4-16 22:28 |只看该作者
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. B) m. I: ~2 R, A3 H- q( Q9 C" F5 A* D/ R, s
我用的是10μg对应1×10^7个细胞,质粒用仪器测过,纯度很好。
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地板
发表于 2011-4-16 22:26 |只看该作者
回复 runsong 的帖子
, |9 K/ l& D, u+ J2 D  F" _& \+ E, o( X: F
谢谢您的回复,能把配方发到我的邮箱吗?不知道为什么下载不下来。idealgas@Foxmail.com谢谢谢谢。

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报纸
发表于 2011-4-13 23:49 |只看该作者
电转液配方

Optimization of square-wave electroporation for transfection of porcine fetal &.pdf

376.49 KB, 下载次数: 793

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板凳
发表于 2011-4-13 23:48 |只看该作者
没用电转液吗。电击时细胞应该悬浮在电转液里。
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藤椅
发表于 2011-4-13 21:20 |只看该作者
我做过一段时间牛胎儿皮肤成纤维细胞的转染,我一般用的都是DMEM低糖无血清培养基,你可以试试。其实影响转染效率的因素很多,不仅有电转各种参数,还与所转DNA的量、浓度,以及细胞密度等相关。
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沙发
发表于 2011-4-13 21:11 |只看该作者
我做过一段时间电转,除了电击参数很重要外,DNA纯度,DNA与细胞比例也很重要。
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