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[请教] ficoll和percoll   [复制链接]

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楼主
发表于 2011-4-20 11:14 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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请问ficoll和percoll两种方法分离细胞各有什么优缺点?
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沙发
发表于 2011-4-20 15:26 |只看该作者
我也想知道耶·~~

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优秀会员 金话筒

藤椅
发表于 2011-4-21 08:47 |只看该作者
本帖最后由 细胞海洋 于 2012-2-13 02:39 编辑
+ p4 N6 m7 U5 k7 N; I# K2 {. N3 \. G3 V  E: }) l
1. 价格:GE的percoll的价格比ficoll贵两到三倍。
1 d# p, [+ J* G, @  i
5 Q: A5 w% q* v1 U( k7 ^+ y2. 原理:isopycnical centrifugation. 即根据密度离心,将不同密度的物质分离开来。(而非根据大小的rate zonal centrifugation)
7 d6 a) [; S$ Y, N, j5 g# n/ r
% r+ k* m7 ~+ ]) q3. 性质:
7 _1 D  Q' P" r( O1 K! |-ficoll: 所有的性质都是特别为外周血的单核细胞分离而优化过的。有1.084 ± 0.001 g/ml and 1.073 ± 0.001 g/ml, 1.077 g/ml三种.
5 V1 [; `" j, F$ Z
4 j0 T1 U9 Q: ]  V, U/ t; V- W  s; C-Percoll: 有PVP-coated,而且性质特殊:在10000g以下,可以形成很广范围的discontinue gradient (from 1.004 to 1.080 g/ml);  U. [( G) L! u% i4 g( c1 p6 y
在10000g以上,能够沉降形成continue gradient. 范围如下:$ O! K" @; |2 ]( b7 p+ X# h$ F$ ]  x0 h! S
1.017 - 1.142 g/ml for Percoll in 0.15 M NaCl, p+ `' t# h8 ^& b; _; x
1.037 - 1.136 g/ml for Percoll in 0.25 M sucrose  r9 n9 E, u% {# V( X, |( s
percoll还有一个优点,它不影响fluorescent activated cell sorting (FACS),所以做细胞分选很方便。8 E- x* B6 n- x! {) B7 {8 G2 y

; F  O/ `0 e' X- j5 B4. 用途:
6 B; ?' c  c2 X5 m* U2 f- ficoll: 首先当然是从外周血中分离单核细胞。不过,同时也适用于脊髓干细胞的分离,骨髓干细胞的分离,也能用于颗粒细胞的分离。当然, 还有一些衍生用途,详见参考文献。) y; r+ G6 i% f+ u6 ~; _* V. ~
9 V1 s+ Q" l/ e
- Percoll: 用途广泛得多,可以自制特定密度的continuous gradient,特别为自己优化分离细胞的实验条件,而且直接可以上FACS分选细胞。由于其密度涵盖范围广,更多的应用在亚细胞结构的分离,病毒分离等。
" M" X+ I$ l8 c( G, ^
; ^6 T/ ?/ @$ j! R* S参考: Ficoll - Isolation of mononuclear cells- Methodology and applications.pdf (874.22 KB) Percoll - Cell Separation Media- Methodology and Applications.pdf (1.07 MB)
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优秀会员 金话筒

板凳
发表于 2011-4-21 08:50 |只看该作者
本帖最后由 dqm185 于 2011-4-21 08:54 编辑
' X' ]' D9 e8 k  H" c8 n; @$ z% X8 C" H- X; X  o
由于附件的版权原因,请版主设置附件回复可见,谢谢

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报纸
发表于 2011-4-21 09:18 |只看该作者
很有用,谢谢

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地板
发表于 2011-4-28 16:16 |只看该作者
很有用,谢谢

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7楼
发表于 2011-5-8 13:52 |只看该作者
很有用的知识,谢谢了

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发表于 2011-6-7 19:44 |只看该作者
很有用,谢谢

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金话筒 优秀会员

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发表于 2011-6-8 16:14 |只看该作者
看看看看

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10楼
发表于 2011-6-9 10:44 |只看该作者
步骤很详细
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