我的小鼠MSCs

gact

D9的小鼠MSCs
( N: v2 \+ k  I( ~1 G
$ q- Y% j3 F/ R. g8 Y, @现在还是这么稀稀拉拉，，不均匀，，皿的中央比较密集，融合了，，，周围稀稀落落，，要不要消化传代了？: d2 T+ v3 D1 Z8 p$ g0 j
( w( z9 w+ }; t
已经两天没有换液了。。怎么办？
6 z8 A. h7 P2 m3 U
$ n) y7 R% w; W- D! C4 c; {6 x没有加EGF，是两只老鼠股骨骨髓合在一起 的，，用的是60mm的皿。
: [8 k# ~3 r. m! \: E0 |. _
7 ?) U8 F) V+ u7 I1 h* H, b贴壁法。。

若兰汀

我感觉你的细胞活性不是很好，首先你要确定你分离的是间充质细胞，至少它是优势细胞群；然后就是你的细胞密度这么小，很难长起来，如果48小时后还没有长密的迹象就很容易老化了。小鼠的MSC比起人的或是大鼠的显得很脆弱，培养基中需要额外添加L-谷氨酰胺，对于FGF及EGF我个人不建议你添加，这两个组分常用于神经细胞诱导时使用，我那他们来诱导Nestin的表达，很难说他会不会诱导间充质分化。

gact

D11的照片。
1 {7 O9 C0 T: g2 A1. 在某个角落，细胞实在太密了，，怎么办，其中大细胞==是什么。血液细胞？
1 c) j' `3 G9 k3 V  T2，怎么越来越多的直线产生了，，这是什么现象？

gact

gact

beginner

这个密度还可以再长一下，另外MSC挺容易聚堆的。越密长的越快。

nihaohao

可以传代，也可以再养几天
2 y" p3 k* R; {5 a* v
' |5 ?4 \2 k5 c( V细胞状态还可以，" j' B/ s0 K0 m
若要传代，如果密集的地方比较少，可以一传一。若密集的地方较多，可以一传二。如果细胞太少，细胞不容易长起来，容易分化。

xwzy

如果周围很稀，但中间已经融合，不传代中间的细胞不会分化吗？

xiaozhu86

回复 gact 的帖子: h5 `) R0 y; X: J( T  A1 h' O9 o
$ N) n0 B4 u: c8 }
我们这边的养的C57一直没有加过b-fgf，原代也都是72小时第一次换液，一直半定量，基本是两天一换，鼠龄一般是四到六周左右的~

gact

回复 xiaozhu86 的帖子
: O  Q" C8 e4 Y* {6 B& W5 r; B. H
前3天，圈全量换液，去除悬浮细胞；8 L- }$ h) o+ w* ~$ j- Q' Y( x
后来都是半量换液的；
8 |" D- q7 S( H) [- G' L9 Z第8天时，连续两天没有换液；
1 O/ }% R2 D7 N4 x( C2 l打算今天第10天半量换液；
8 S5 o4 b' u) U/ k" C/ y不加b-FGF，没关系吧；6 T4 z1 ~# \/ x; o
大家用的是sigma 人的 b-FGF么？
. @3 O! R1 u* @/ j% ~