我的小鼠MSCs

gact

D9的小鼠MSCs
" \2 k) E  q7 O
' v. c; d. j' x) L  }( @现在还是这么稀稀拉拉，，不均匀，，皿的中央比较密集，融合了，，，周围稀稀落落，，要不要消化传代了？/ \+ n4 }- |4 i* c
$ [, x: d4 @: e& h6 u! I4 h# r
已经两天没有换液了。。怎么办？
1 r2 y6 H5 L2 h0 e
; M% d8 r! N1 Q; d没有加EGF，是两只老鼠股骨骨髓合在一起 的，，用的是60mm的皿。+ G  \9 e, W/ ?& x* w, B, k$ {

1 _+ y3 k' u! }) Q, p6 {贴壁法。。

gact

gact

细胞，，中间有大大的“细胞”，，，是什么啊？？？

gact

今天不换液，，就会死了吧？？？

iceyang

大大的看上去不像细胞，可能是杂质，也有可能是细胞团块。中间的太密的话就应该传了，下次做原代的时候应该种在培养皿上之后轻轻的晃一晃，这样细胞可以在皿上分布的均匀点，建议你一传二。另外小鼠的BMSC的确不好养的。

biotly

还要再长一下，可以先换一半的培养基，不要全换，过两天再传。

aoppolle

建议胰酶消化一下，培养液重新悬一下，让细胞均匀铺在培养皿

biotly

是不是等下一代传代的时候注意一下啊，这一代就算了，刚开始原代的细胞还是少消化的为好！图上的细胞也并没有长得太密，MSC消耗营养也不多，换半液长两天没问题！

xiaozhu86

应该是还不能传代，密度不够，小鼠的BMSC密度依赖性较高，半定量换液两到三天换一次问题都不大~原代状态不好，传代之后有长好的可能性，但多数感觉还是不好，所以就再养养看吧~

gact

回复 xiaozhu86 的帖子
- ]1 c6 [# b, e6 H4 ~9 z1 z
: G8 s1 R9 c6 {) p! N前3天，圈全量换液，去除悬浮细胞；6 C, H; o3 _' g' X
后来都是半量换液的；3 Y; |! ?1 j/ J
第8天时，连续两天没有换液；& p# [' q5 i! e- t* k; {1 G
打算今天第10天半量换液；
- y1 V! w$ l! P% [+ ^% |& ^" R不加b-FGF，没关系吧；
: d8 O3 K# e/ }" M) r大家用的是sigma 人的 b-FGF么？
% P* f' s. n  G+ C