新手求助，请来看看我养的胚干出什么问题了

wang66

之前自己和实验室里从来没养过胚干，老板有意要往此方向研究，也只有硬着头皮边尝试边烧钱了 ! c# |) j! C+ x8 L

  {& J: [  Y" k4 _3 ~这是刚拿来养了3天的图片，感觉那个时候的细胞状态好像不太好，而且也有分化.' l1 v1 \5 X( L& |
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czzhaozhu

人ES细胞培养要比小鼠ES的难掌握，从图片来看，feeder的密度太稀了，而且总感觉你的人ES开始时状态就不是很好，集落立体感不强；至于后面，细胞不仅分化了，而且死亡得很多。所以可能存在2方面的原因：feeder和ES本身状态。

花开次第

MEF的单层密度有些稀，一般来说小鼠ES的单层密度80%才好。人的ES单层密度要求更高。而且细胞的克隆太大就会有分化的迹向，要及时传代才好！

cony

已分化

nculsa747

增大MEF密度,问题即可解决！

rongrong

感觉MEF的密度有点低，干细胞的边界还算清晰，但中间有空洞，可能是克隆太大的原因

是鸟就要去飞

你的细胞太差了，边缘性都没有了，而且分化了。建议你好好看看论坛里别人发的养干细胞的方法

stonelee2050

细胞状态不好啊，貌似是分化了。加大MEF量，培养基里加上青霉素链霉素。

jefferson

不是相差照片,不能准确判断状态以及MEF的状态1 v5 p! z0 ]& V

* R3 b& e* @& B9 X, z2 X从这些照片看, 3天的克隆中,照片1和2中的克隆还行,但是作为3天时候的, 克隆太大了, 这样长到5天后克隆容易分化, 建议传代时克隆再小些. 照片3中的克隆焦距没对准, 不能判断; 照片4种的克隆中间已经有分化迹象, 建议可以用机械法把中间隆起发黄的部分挑除.   w2 M- y5 p! [& ~" Q" d1 s

$ n/ J/ d) C  K5天的克隆中, 照片1和3的克隆已经出现分化, 照片2的焦距不是很准, 目测有部分也开始分化了,但大部分还是未分化的, 如果出现这种状况, 应去除分化部分,尽快传代.
* P4 v$ ^6 b+ `. z: T6 L5 H1 }: r: {2 ~, [
不能判断MEF的状态好坏, 不过MEF的密度可以稍微再高点.6 G4 [8 s4 J" L! e% K# D: Z7 O2 B

2 I: k& J. `, y9 m3 Y建议把整个培养体系和过程发上来分析

juan880929

是人的胚胎干细胞还是小鼠的