请高手帮我看看小鼠MSC,有问题求助

生物化学zy

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, p2 z2 ^1 Z: t3 l* ]8 |& T请各位高手帮帮忙.我用ICR小鼠进行MSC培养,使用全骨髓铺板法,一个小鼠的两个后腿,铺板于6孔板的2个孔.3天后进行全量换液.使用的培养基为! f. s" \7 N/ o# J8 u
a-mem(hyclone)+10%FBS(PAA)+1%p/s(PAA)+1%NEA(PAA)+1%Glu(Gibco)  q6 a" U* b6 ^+ B7 W+ P, b
在第3天全量换液后细胞的状态如下,出现较多的贴壁的纤维状细胞,但是纤维状细胞上还有一层点状的细胞,也是贴壁的.应该是杂细胞2 b" K# v0 S% q" v
想问一下高手
! H$ W& ?) x, Q1.这些点状的杂细胞,如何去除?是经过细胞不断传代与换液就可以吗?6 G: t* n& g% ~- U
2.我分的小鼠的MSC第3天的细胞的状态如何?能否长起来  P; A, H- [5 v
3.若进行原代到p1的传代的话,细胞要生长到何种状态就可以进行,是需要进行1:1传吗?也就是消化下来重新进行铺板.& y: q  W) N) {0 M
请求高手给看看
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生物化学zy

4,3 是10倍镜下; @" L, S" j1 I3 q+ a; I; K
2,1是4倍镜下

生物化学zy

回复 1301918986 的帖子
# `+ G  w$ p6 X  E3 Z7 @' P, P! h4 K6 M. r" x- X
是原代的细胞.第3天的,刚开始时铺板3天,没有换液,在3天时全量换液,就会这样.
: `" o8 [# {" K6 @* _/ H% ~) Q9 ^& r你们第一次传代时第几天?

生物化学zy

回复 大少爷 的帖子, q" {2 F( G& w. G, g
8 P8 ]4 a7 E2 s
胰酶消化时的时间是多久即可?消化下来的细胞是MSC.未消化下来的细胞是杂细胞.室温?还是37度消化?

生物化学zy

回复 bb6120 的帖子& R& v- p$ E: h- @, w- l
# `7 S+ z9 F+ A" [# P. D' [
但是说MSC长的太慢会不会导致其分化.有没有这说法?

生物化学zy

回复 1301918986 的帖子5 L. b8 I4 A& i* |+ @2 v: L
. O/ m6 Y/ j& @, M8 A
太敬业了,谢谢.

生物化学zy

回复 759512199 的帖子  A* m2 f8 S. i; O% V0 g

' k) }+ }6 a7 }9 }! t) z传到第几代时,细胞会比较纯?基本没有杂细胞了?我想诱导分化用,第几代时进行诱导分化

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回复 1301918986 的帖子6 d6 O) R! Z! j3 P8 J- z

" C* h. W# Y+ K传到第几代时,细胞会比较纯?基本没有杂细胞了?我想诱导分化用,第几代时进行诱导分化

生物化学zy

回复 759512199 的帖子# p# |$ i% {5 p

: b+ A' A" G. l3 f) L谢谢,了解了

生物化学zy

回复 759512199 的帖子# x, U& X0 _( X  a
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MSC在细胞6孔板中,1孔冻存一管后,复苏6孔板的1个孔,密度会小吗?还是说,冻存的时候细胞就少?如果是这样的话,建议多大板子冻1管?