请高手帮我看看小鼠MSC,有问题求助

759512199

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$ l/ w$ ^% F1 N- `到第3代左右MSC基本上就比较纯了。做分化的话三四代就可以试着做，因为随着MSC的传代干性可能降低，细胞也会老化。

tingwuyu

应该是破骨细胞，那个贴壁比较牢，可以通过胰酶消化的方法去除，可以加胰酶后放置于培养箱内5min后即可基本将MSC消化下来，一般传至3代即可纯化。

1301918986

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9 V. {- C" C1 q4 c) T$ {8 R4 t呵呵，一般在二三代就比较纯了。至于第几代进行诱导分化这个我没做过，不是很清楚。

生物化学zy

回复 1301918986 的帖子" }3 m9 G0 E4 j0 X; o
1 {* y2 ^- c. K7 f( S
传到第几代时,细胞会比较纯?基本没有杂细胞了?我想诱导分化用,第几代时进行诱导分化

生物化学zy

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( \- Q1 n. ?# r0 _5 B2 m
0 a$ U' n: ]* I/ p) D5 ~传到第几代时,细胞会比较纯?基本没有杂细胞了?我想诱导分化用,第几代时进行诱导分化

生物化学zy

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- u9 N9 `) E  A" E/ h! A" @' D' W" F! v" p7 h/ ]
太敬业了,谢谢.

759512199

全骨髓法培养的原代杂细胞就是很多，可以通过传代除去。第一次传代时细胞密度不要太大，1:1传代就好了。

1301918986

回复 1301918986 的帖子3 t5 d9 w+ v7 @3 h& @
: W* G5 P7 f" c
呵呵，说错了是48h全量换液，去除血细胞。

大少爷

判断胰酶消化的时间可以在显微镜下观察细胞状态就行了。消化下来的细胞是MSC.未消化下来的细胞是杂细胞.可以室温消化。

1301918986

回复 生物化学zy 的帖子. L9 |: k: F& B" `/ P

3 h1 ]* X% t& ~" B我们在差不多72h就全量换液了，但是换液是不要摇晃，四五天第一次传代。