请高手帮我看看小鼠MSC,有问题求助

生物化学zy

回复 bb6120 的帖子3 R0 h( a, B8 w; n; d+ F
: N- ~# B. y8 v: C
但是说MSC长的太慢会不会导致其分化.有没有这说法?

生物化学zy

回复 大少爷 的帖子6 W' l9 n8 K2 t5 g$ u  ^

2 F; S* e. {2 F: C) v  `, H; W% T胰酶消化时的时间是多久即可?消化下来的细胞是MSC.未消化下来的细胞是杂细胞.室温?还是37度消化?

大少爷

不会是破骨细胞吧。纯化：待细胞融合达8 0 ％ ～9 0 ％ ， 用胰酶消化，按1 ：3传代，利用破骨样细胞与M S C对胰酶敏感性的不同， 可 以粗略分离2 种细胞 。梭形细胞先脱壁， 呈圆形， 破骨样细胞贴壁牢固， 不易被消化集脱壁。倒置显微镜和 电子显微镜下观察细胞形态。细胞种植后， 1 2 h 内完全贴壁， 变为梭形。传代后大部分细胞和其他杂细胞(包括破骨样细胞)逐渐被去除。至第3代剩下形态较为单一的成纤维样细胞， 呈漩涡状、 辐射状列， 即为间充质干细胞 。

bb6120

换液时要用PBS或者培养基洗几遍。之后再换上新液。干细胞传代跟其他的一样，都是张到90%左右就可以传了

生物化学zy

回复 1301918986 的帖子# A5 {7 j- p  L* M& Z

4 M0 F3 U. [# a* t( }( F, G3 A1 X是原代的细胞.第3天的,刚开始时铺板3天,没有换液,在3天时全量换液,就会这样.7 y/ ~" n  C( D' S" L
你们第一次传代时第几天?

1301918986

照片不是很清楚，杂细胞的话，在传代过程中就会去除。这是原代吧，如果克隆中心的细胞比较密集的话就可以1:1传代了。

wnavy200299

讨论讨论，最近也在摸索这玩意儿，闹心ing~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~
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生物化学zy

4,3 是10倍镜下
3 d7 u& d. ~5 I: n* ?' a/ ^, k2,1是4倍镜下