WB条带丑陋，求鉴定，求指点，煮样不充分orDNA粘稠？

7ubo

2011-6-13 20:20 上传

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如题，6cm的293T用200ul loading buffer裂解的，煮过以后离心是有沉淀的。

7ubo

回复 shuixiao 的帖子/ z8 T; h1 y" |/ N/ p
0 P" }' s5 @, l, r* p2 `. X9 Y
用什么方法定量？BCA？不会很麻烦吗？据说还要先作标准曲线。有没有简单一点的方法？直接测280？我用的是绿色荧光二抗，奥德赛扫膜。

7ubo

回复 aminhair 的帖子
- M1 B3 f: I" y9 x; q5 h- @( y( a* h4 T  q7 s% a! d$ B
谢谢，自己做的

7ubo

回复 zhenhua 的帖子
+ l, ^& f$ ~% V" W7 Y! z; `3 L( _7 g
6 T& P5 P7 _* E2 y5 T3 o2 P每个孔上20ul。! f, n# e9 v/ f# C* P3 B
煮20-30分钟不会使蛋白降解吗？100度吗？

7ubo

回复 hndxws 的帖子
8 \9 L+ a# u* i' ]! e- R
0 G4 U1 n! t# j+ W/ g* Y朋友，你的头像是一种带GFP的膜蛋白吗？GPCR？

7ubo

回复 wenyangapple 的帖子
# m: G5 c& d- M. x" N' k$ Z5 t+ m
长满的6cm的皿的293T用200ul的SDS loading buffer裂解的，是不是加少了？

7ubo

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0 X( ]+ g- Z, T8 l
" t0 ~$ t, l( m/ p2 `APS少加点是不是比较好？