脐带间充质干细胞的培养基要加什么因子

1301918986

各位大侠，我最近开始培养脐带间充质细胞，每次原代都成功了，可是后面传代以后细胞的状态就很不好。应该是培养基的问题吧，我现在用的是DF12加10%胎牛血清养的，请问是不是还需要加生长因子之类的，浓度是多少？谢谢各位啦！

hslh

我们加EGF

lili_19840516

我们加的谷氨酰胺

352167963

你要注意传代是原代细胞生长浓度，如果元代细胞长老的话，接种的效果就不会很好。同时也要注意传代时接种的浓度要适宜。然后培养基里面加的因子要包括贴壁因子和生长因子。

1301918986

回复 hslh 的帖子1 A4 t1 V" P3 ]# L6 `- J9 k; [
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呵呵，谢谢啊，浓度是10ng/ml吗？

1301918986

回复 lili_19840516 的帖子+ p! ]6 e6 `' x+ U7 s( d( P: B% O- _3 j

  i* }& g- ^- ~7 b+ v2 @' q( ~! g谷氨酰胺一般培养基里面不是都有吗？你的意思是它的浓度比较大，还要另外加吗？

1301918986

回复 352167963 的帖子
. R- Y, N% L- K% O' J% j- U. l
3 l6 a( t/ e& Z- Z原代啊，我用的是组织块培养法，当克隆中心的细胞比较密集的时候，我就传代了。传代接种密度差不多是1.5*104/cm2，应该不小吧。

352167963

回复 1301918986 的帖子% U9 L: H* U, [/ P
0 O' e% Q! H/ P: J
不是不小 是太多了  一般情况下适宜的接种浓度在0.9X104/cm2,,,接种浓度太高的话细胞的生长状态也不会很好的。

柏林小杨

回复 1301918986 的帖子$ V: q5 R6 T: C

( i( D7 L! G% Q, U: I! _/ i你的组织块是怎么贴上的，我贴的组织块总是飘起来，好长时间也长不出细胞来，前提条件我们的培养基没有问题，用酶消化的细胞原代和传代后都长得很好，就是组织块长不出细胞来。

柏林小杨

回复 1301918986 的帖子& x6 K- o% K0 }  y2 J

$ o( ~- d7 m: r! X5 Z( n接种密度大了。