关于间充质干细胞培养的一点经验

hygene

我作的BMSC没有离心去胰酶，长势也可以的。

hygene

回复 franty 的帖子# m4 r5 s( s5 o; k1 r6 n8 ~
* z, N1 Z' k. T$ s
猜测可能是要用那个培养瓶来接种细胞。呵呵。

flyingpnmc

楼主的经验是不规范的实验室做法，如果要做好间充质干细胞的培养，还是需要进行规范的培养，包括培养基的选择、血清的选择及浓度、添加物的选择及浓度、传代比例、消化酶的选择及浓度、消化时间都是要有一定标准的。楼主随机的传代比例对细胞最终传代次数是有很大的影响的。

翅膀111

回复 yang179 的帖子
+ B" p1 D' @* N7 R
9 x! `  s3 c" r/ }0 |对，我和这位兄弟的情况差不多，也是T25的瓶子，1ML胰酶消化后去掉胰腺酶，然后培养基中和，吹打均匀后传代，细胞生长的也很好。

youtellme

不离心去胰酶做的应该没差别的，消化的时候让酶液浸润下细胞就倒掉。然后就可以不用离心，消化会加培养基吹散接种了。

daytoday

楼主用DMEM-HG培养基来养MSC，真是强啊

saintwang6521

谢谢楼主

wangweilie0418

学习一下

taxuewuge

回复 yang179 的帖子
7 J) p' o. k6 x0 [1 ]  P, @
& Y0 Z! @7 u9 S+ e2 Y( _( q$ Q谢谢

yang179

回复 taxuewuge 的帖子3 y& [4 v8 e- S+ D' s8 ~# {

7 f7 M+ s. z! V) G' Q; n# V这个要注意掌握，时间和你加的胰酶量、消化温度有关。一般镜下观察缩成网状形的时候（不要等到所有细胞都缩起来），可用移液管去掉大部分胰酶。然后继续观察一下，这个时候残留的少量胰酶会继续消化。等基本成球形的时候，添加培养基，轻拍培养瓶底部或者移液管稍微吹打一下，基本就脱落下来。