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[请教] 普通PCR制胶问题   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2011-7-23 16:38 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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一半绿色一半蓝色 本人使用北京六一厂的电泳仪,制0.25g琼脂糖/25ml的1%的胶,加入3微升的GOLDVIEW,为什么紫外灯下看出现这样的结果? 一半绿色一半蓝色
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沙发
发表于 2011-7-23 17:23 |只看该作者
我以前用GOLDVIEW在紫外下看也是一半一半的,感觉染料会在电泳的时候跟着跑,所以现在还是用EB了。。。
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藤椅
发表于 2011-7-23 19:34 |只看该作者
没用过GOLDVIEW,感觉EB挺好的啊,虽然有点毒性,但实验时自己多加注意就没事啦!!!
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板凳
发表于 2011-7-23 20:29 |只看该作者
为什么不用EB 感觉还可以吧
' o: W& f+ o3 B7 \. }有毒,但是我们老板说国外的很多牛人根本不用手套 裸手抓都行
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报纸
发表于 2011-7-23 20:34 |只看该作者
回复 like_gj 的帖子0 u' K0 ]# |: M5 `6 M

# O8 ]- }. `9 v3 D+ x8 M以前传说国内牛人,现在传说国外了?3 s' `7 i" ~8 C- T7 ]5 x: s3 q$ A, W% H2 i

, z; U! N* K6 ?/ Z2 b% f呵呵8 u' J0 L2 Z! L! l. `" ~

% E. ?% J1 s3 i3 v还是小心点好,健康第一

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地板
发表于 2011-7-23 21:22 |只看该作者
GOLDVIEW是带正电的,电泳时会向负极跑,导致靠近正极的一半GOLDVIEW的含量降低。
7 Z1 N* M6 G6 a% x) UEB也会有相似的情况,但只要电泳时间掌握好的话是不影响的。
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7楼
发表于 2011-7-23 21:29 |只看该作者
我们实验室也是用的EB,如果跑的时间长的话是会跑掉一些的,顺便问下,EB的终浓度最优是多少啊?
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8楼
发表于 2011-7-23 22:35 |只看该作者
goodview 就是这样,条带不太漂亮,正式照片还是EB好点,goodview 如果量太大电泳条带反而变形。
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9楼
发表于 2011-7-23 22:55 |只看该作者
回复 yuanyan2010 的帖子
; S$ s1 ^0 R. m  m$ Z' M; @
4 i( z. E, }3 R) o呵呵呵呵。我们从来都是靠感觉。
0 [' T) a# g4 ^* D7 K% Q/ h& p橘子皮色的EB每20ml胶加1滴。依次类推,跟着感觉走。+ z& J6 G3 e  r8 n5 r' j
不过也没办法,EB有毒,用量小,谁也不愿意冒险费去小心翼翼地称。呵呵》》》
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10楼
发表于 2011-7-23 23:29 |只看该作者
你跑的胶有问题,跑太远了吧,一般不超过2/3全长,GOLDVIEW用的少,我们这里用EB,加入时要凉一点再加,还有人放的梳子都贴到底面了,也不行
$ g- s. H  T2 ]+ h8 x7 p2 \4 N5 D
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