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发表于 2011-10-25 17:22 |显示全部帖子
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1,含血清的培养基一定要洗干净5 g2 {. K) V* x% j7 s. |
2,配制或稀释胰酶无论用什么缓冲液都不能含钙镁离子
& p4 X" f7 B( a' _3,胰酶浓度根据细胞确定,用下限: g: W7 d, O& m' v4 l( u+ d. ^. f5 U
4,胰酶加进去轻轻摇匀覆盖细胞就行,不能提前吹或者拍打,如果细胞成片下来就不能弄散了; J# w7 l# V- z
5,刚开始做的时候可以在镜下观察,细胞变性后把瓶子立起来,不和胰酶继续接触,回台子终止
* {2 e' u( Z) I& |) m6,可以把胰酶吸走,加入培养基吹打分瓶,如果没有信心的话,终止血清用0.25%胰酶的5%就可以,可以直接吹打,但是最好不要吹起很多泡& T2 }5 j' u* n# u" T: o) ~
7,在胰酶浓度够的前提下,如果消化不好可以在37度孵育,上限是半小时0 Z3 o" _) _! T$ X0 c% q; R
8,胰酶要用进口的
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