人的原代培养

yangpan521

哪位高手做过人的原代培养，我的做法----采用组织块培养法，材料---药流畸形胎儿8月龄，9天是长出了细胞，但是一经消化细胞就变形了，初步判定可能出现低渗。培养液为10%ＦＢＳ，请指教

evial

是不是消化时间太长了？胰酶浓度呢？

mhm289@live.cn

光看标题，吓到！

oucflora

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发几张图看看

yangpan521

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% M4 W0 R  U! }- F( F' k5 N7 [图片没拍，胰酶是买sigma公司的成品，回来分装的，

dongxin

建议：首先试用胶原酶（作用会温柔些）；其次hESc喜团块状生长，你的是不是消化过了(成单细胞不可以)！祝好运！

单个核细胞

看到标题，吓我一跳，楼主可否对这个“人的培养”做个介绍。

evial

一种是细胞就是变化了，变得畸形了。胰酶用0.25%的，无血清情况下3分钟以内，经常晃一下观察细胞洗下来没有，不要晃出来。看着都变球状浮起来了就可以加有血清的培养基中和阻断反应，然后马上离心去掉上清液。

yangpan521

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% y! @+ O( X9 [( b& m9 d! }# b组织块长了9天才爬出细胞来，消化时外围的细胞都掉了，紧贴着组织块的细胞就没掉，如果消化时间长点，贴着组织块的细胞掉了，可是外围的细胞都已经变形了。

rain2402

讨论幼儿园教育吗？嘎嘎。。。。