ips全军覆没，我该怎么办？

oucflora

回复 rongrong 的帖子; r. x  U9 f9 q
- Q0 w& B3 z! D( v7 F
20%,曾经一个师兄用过更高的浓度，大概30%，细胞情况也挺好。

oucflora

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/ y, o2 H- D" X) s. g7 I) ~2 Z
& ^2 n( M+ }# s. T4 K/ [& v: D1 c2 z在-80度放置两天对细胞成活率影响不大，倒是液氮量特别少，会导致细胞死亡较多。( |+ |# s$ Q. i! ^* l2 ^/ P  w$ d
+ m- A/ w' f, \# L/ v
补充内容 (2011-9-5 20:27):) `! N% L+ W9 Y  @; c
不过如果你们的液氮罐是保温较好的进口的话，影响倒是不大
: Q) F5 @3 I' n. G1 X0 h# E( s9 s+ ?3 o- S$ v
补充内容 (2011-9-5 20:28):$ g( K2 r) z$ C. s
“进口”的意思是“非国产”

evial

FBS：DMSO=9:1你的浓度低了

rongrong

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- h/ B# W# v9 U: r) q& X" b" y+ h9 e6 h
3 X$ S$ e2 h% \' V2 q恩，好的，谢谢鼓励啊，继续前行再接再厉

jiefengbing

回复 cicadacjk 的帖子
" D3 m) `) s: W8 s, J
5 r% R1 `4 [: X9 }) u9 E1 s3 Swicell 复苏ES不需要离心？正好我手头上有一份，200g离心5min,然后gently re-suspend cell pellet.不知道您的步骤是哪个版本，可否让我看看？

hnczlw48005

复苏温度应该在37°，冻存干细胞时的血清很重要，最好用进口血清，浓度越高越好，可以用90%FBS+10%DMSO作为冻存液。

yangel

rongrong 发表于 2011-9-4 11:45
; a" J3 |. @' |8 @1 E3 W7 h大家好，我是一个IPS的培养新手，我4月份冻存了一支ips，冻存液干细胞的全培养基+FBS+DMSO=6:3:1，复苏时铺 ...

, E( |6 s' N$ o" C8 w& y做的没错！复苏成这个现象也正常，再养几天看看有没有小的ips clusters长出来。要提高复苏效果的话用Y-27632处理24h。