求教：成纤维细胞原代状态不好的原因

牙牙丫丫123

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' [+ C. ], m: z4 ^& B2 F: r7 b  W我养的是猪的胎儿成纤维洗吧，原代培养方法是0.25%胰酶消化，终止离心后接种，10%FBS的培养液，原来用这种方法培养细胞生长很好，可是这次培养时，第二天细胞长出来就特别老，而且细胞全是小黑点，请问这是什么原因造成的……是血清或者培养液PH值的问题吗？
- [9 c/ }9 R! t: p

goohongzi

看着这个一团乱糟糟，不是支原体之类的污染，就是细胞长的太过了，按理说，原代细胞最容易培养了。千万不要让它长过了，或者污染了。建议原代培养时常规加杀支原体的药物和双抗

huangcong1988

回复 liuhuijing 的帖子4 S5 U4 X  K! C) g. O8 Y4 M5 ~

& Q/ Y) m  T" F1 _5 `6 X9 h& J刘会敬？这个还是很好养啊

smartyyu

怎么老有人说黑胶虫，不存在的东西吧

zhangjinami

如何鉴别一个细胞克隆
( V) Q: f* ?& l. n5 ^如何终止胰酶消化 用胎牛血清
& l# |& B: H5 c6 @; F如何分离

liuhuijing

回复 星移龙一 的帖子
! |4 Z; h: `" l6 ^% L, L" f2 j" D. F& v( I$ F
想请教一下具体养猪成纤维细胞的做法，我们这边还没养过，谢了。。。。

牙牙丫丫123

回复 wangshumin12311 的帖子
8 u) E5 ]* E6 C$ e9 {$ ?; P0 m1 R7 f' |7 }8 v' c) e( |
呵呵……是呀……

wangshumin12311

回复 牙牙丫丫123 的帖子
; m! u6 n; |; S8 e8 M! V
7 X3 G* n# G* g$ k天呐，没想到随便都能碰到母校的学生，，你是刘忠华老师那边的吧，，，没关系，成纤维细胞重新做，状态不好就扔了

liuyul03

从你的图片来看，首先你在做细胞接种时没有混匀，有的地方过于密集，形成复层，而有的地方还没长。最后一张图片还可以，但也有老化迹象啦。

huangcong1988

回复 牙牙丫丫123 的帖子! @) e8 M) J: |5 \" ~/ N
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可以的，你转高倍镜下看，可以看到细胞之间的小黑点，是能看到它移动的