求教：成纤维细胞原代状态不好的原因

牙牙丫丫123

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我养的是猪的胎儿成纤维洗吧，原代培养方法是0.25%胰酶消化，终止离心后接种，10%FBS的培养液，原来用这种方法培养细胞生长很好，可是这次培养时，第二天细胞长出来就特别老，而且细胞全是小黑点，请问这是什么原因造成的……是血清或者培养液PH值的问题吗？1 U, A/ ]( a5 q: n; [* S; a

wangshumin12311

这细胞救不回来了，，，重新来过，，，看有没有支原体或者细胞受啥罪了，，，血清正常的话不会出现这情况，，，，话说你是哪个单位，，，做猪的？

牙牙丫丫123

回复 wangshumin12311 的帖子4 C7 ~! N9 r5 k

6 R  ], k2 o/ Y+ m' P/ f8 ~9 ^- e您觉得这更像是支原体污染？我是东北农业大学的，我们实验的主攻方向是猪

军医

是不是抗生素加多了？

星移龙一

我们实验猪的用的都是15%~20%的FBS，原代都很好啊，传代生长也很好，不知是不是这个问题。

牙牙丫丫123

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6 H; C; @) D. m+ J. {# w
0 K/ W+ s; ~  s3 O) U我加的正常抗生素用量

牙牙丫丫123

回复 星移龙一 的帖子* I: {# P4 b8 o# x  ]( y  B

9 _+ K/ T% x* t; T; k能请问一下您是怎么做原代细胞培养吗？4 V6 `* s, b( f2 O% f- U5 r: Y  m

牙牙丫丫123

回复 星移龙一 的帖子. C8 a2 b( g7 r, {
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还有，我这次使用的是10%的培养液，有没有可能是血清质量本身不好，然后再加上血清浓度低，导致细胞营养不良呀……然后细胞就长成这样了
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军医

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我们用10%的血清养原代也挺好的，是不是时间长了，迁出的细胞长的太密了，生长抑制了

星移龙一

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胎儿的取部分组织，剪碎后涂板培养，
) y9 F1 i5 b/ ?6 c. o5 {' p% C) {4 |成体的一般是耳源的，将毛刮去后，剪碎涂板。