求教：成纤维细胞原代状态不好的原因

牙牙丫丫123

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我养的是猪的胎儿成纤维洗吧，原代培养方法是0.25%胰酶消化，终止离心后接种，10%FBS的培养液，原来用这种方法培养细胞生长很好，可是这次培养时，第二天细胞长出来就特别老，而且细胞全是小黑点，请问这是什么原因造成的……是血清或者培养液PH值的问题吗？
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goohongzi

看着这个一团乱糟糟，不是支原体之类的污染，就是细胞长的太过了，按理说，原代细胞最容易培养了。千万不要让它长过了，或者污染了。建议原代培养时常规加杀支原体的药物和双抗

huangcong1988

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" N3 u- R6 L. C- l% {6 S
刘会敬？这个还是很好养啊

smartyyu

怎么老有人说黑胶虫，不存在的东西吧

zhangjinami

如何鉴别一个细胞克隆( a0 h) c5 S" h
如何终止胰酶消化 用胎牛血清
3 r( t, y2 O4 t1 q如何分离

liuhuijing

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  X1 @9 H' E# w- t想请教一下具体养猪成纤维细胞的做法，我们这边还没养过，谢了。。。。

牙牙丫丫123

回复 wangshumin12311 的帖子( K# m2 t, \; A3 N, Q
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呵呵……是呀……

wangshumin12311

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天呐，没想到随便都能碰到母校的学生，，你是刘忠华老师那边的吧，，，没关系，成纤维细胞重新做，状态不好就扔了

liuyul03

从你的图片来看，首先你在做细胞接种时没有混匀，有的地方过于密集，形成复层，而有的地方还没长。最后一张图片还可以，但也有老化迹象啦。

huangcong1988

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9 X4 K& V" p* m: O! o. f. C. A% W- x7 l
可以的，你转高倍镜下看，可以看到细胞之间的小黑点，是能看到它移动的