求教：成纤维细胞原代状态不好的原因

牙牙丫丫123

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" L* r- [/ }) m+ x  ~. _我养的是猪的胎儿成纤维洗吧，原代培养方法是0.25%胰酶消化，终止离心后接种，10%FBS的培养液，原来用这种方法培养细胞生长很好，可是这次培养时，第二天细胞长出来就特别老，而且细胞全是小黑点，请问这是什么原因造成的……是血清或者培养液PH值的问题吗？
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goohongzi

看着这个一团乱糟糟，不是支原体之类的污染，就是细胞长的太过了，按理说，原代细胞最容易培养了。千万不要让它长过了，或者污染了。建议原代培养时常规加杀支原体的药物和双抗

huangcong1988

回复 liuhuijing 的帖子
1 q0 g/ O$ n% t9 c$ c- ^% _8 ?
0 n( D* N( [. e% b1 ]' i刘会敬？这个还是很好养啊

smartyyu

怎么老有人说黑胶虫，不存在的东西吧

zhangjinami

如何鉴别一个细胞克隆
& v$ ^% w9 M" D# l. l6 G$ K3 m5 ~如何终止胰酶消化 用胎牛血清2 u9 e8 j$ z+ O" }: `
如何分离

liuhuijing

回复 星移龙一 的帖子" s+ ^' ^( X' B: J. g, H
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想请教一下具体养猪成纤维细胞的做法，我们这边还没养过，谢了。。。。

牙牙丫丫123

回复 wangshumin12311 的帖子0 m- `! D: r$ b% D1 v

4 Y% x  z7 p7 V! y0 g呵呵……是呀……

wangshumin12311

回复 牙牙丫丫123 的帖子% ?" d  e" C% I3 k) t1 {$ {# h
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天呐，没想到随便都能碰到母校的学生，，你是刘忠华老师那边的吧，，，没关系，成纤维细胞重新做，状态不好就扔了

liuyul03

从你的图片来看，首先你在做细胞接种时没有混匀，有的地方过于密集，形成复层，而有的地方还没长。最后一张图片还可以，但也有老化迹象啦。

huangcong1988

回复 牙牙丫丫123 的帖子# C" T- {6 z" y0 }3 Z

( {( I' ^3 \# K( ?$ w$ g- s! ?9 A; k可以的，你转高倍镜下看，可以看到细胞之间的小黑点，是能看到它移动的