我的间充质干细胞不长！

zhuzhoujie24

用的是DMEM高糖培养基，血清用的是四季青。细胞原代获取的数量还可以，但是就是在培养基里不怎么长，都1个多礼拜了！就是没见长，也没有污染！请问这是什么问题啊。对了，我没有纯化i细胞，孔板里还有很多巨噬细胞和造血干细胞...

liluli0715

说清楚培养基的组分，还有各成分生产厂家；我以前用的是aMEM（GIBICO）培养液，现在用DMEM-LG （HYCLOME）长得就不好，你的多看看别人的文献！

wangfw

干细胞原代的培养关键点在两方面，一是样品是否无菌操作，样品一旦污染培养无从谈起；二是培养基的成分，我个人认为原代培养用血清还是进口的好一些，3000元/500ml以上的血清基本可以买足干细胞培养所需，还有特别注意一些微量因子的添加，比如细胞生长因子类，另外加少许b-巯基乙醇可以促进细胞的贴壁。一家之谈仅供参考。

luoziwei

据说DMEM粉剂的培养基在市面上有很多假货，一般凭肉眼看是看不出来的。就我上次用的自己配的培养液细胞长的还不错，现在用的培养液是从另外一个代理商那里买的，现在细胞就长的不好。搞个我很是郁闷

dophins

换用DMEM-F12就可以了，以前我也是和你的做法一样

紫电苍炎

用的是DMEM高糖培养基，血清用的是四季青。, \; D7 k) J$ `" U

# t! i2 y' ]9 v! ^* x& ]3 d& D" c/ \- g  以前也用过这种培养基啊，作用挺好，基本3-5天就可以消化。是不是楼上说的水货情况啊。换个代理商吧。

透明之蓝

zhuzhoujie24 发表于 2011-10-28 13:52 7 v& Y1 \* g4 k- t  |
用的是DMEM高糖培养基，血清用的是四季青。细胞原代获取的数量还可以，但是就是在培养基里不怎么长，都1个多 ...

( @0 @4 h: V3 ~8 x- ?# k0 H5 I# [
四季青可以用，核实一下血清是否有问题！可以向厂家要之间报告，核对一下产品真伪！不过，个人感觉国产的应该没有再仿的了~( Q$ _  X% Y+ _0 M  {( ]
你的原代细胞的来源是什么？？？？

干细胞换包包

假货真坑人。。

君鸿

你错就错在不能用四季青的血清培养，应该用HEYCLONE的金牌血清，四季青只适合终止胰酶消化用，我们是通过几个月培养帅选的增值最好的血清

sailree

可以用DMEM-F1210% 加血清胎牛血清 （四季青的也可以用）或者使用GIBco的无血清培养基或者是lonza的无血清培养基（加基质）后者贵点，如果不用于临床的话可以用前面的方法。你说的还有其他杂细胞，那要考虑在组织处理过程中是否将血块，血管剔除了或少量残留，还要考虑是否有支原体和细菌可以用高倍显微镜看一下。这些都可能导致细胞生长缓慢，还有就是我也做到过有些组织分离出来的细胞是有可能长不好的。弱弱的问一下是楼主是用酶消化法还是组织块法？