逆转录病毒在293T细胞中包装，一般多少时间收病毒啊？

shylook

yangpan521 发表于 2011-10-29 10:05
6 @0 p/ O. c0 s5 T4 c+ x; S0 s: t我们这一师兄将病毒液放入了 -80度，被老师骂了一顿，老师说病毒液不能存放，应现收先用。如果细胞没备好， ...

8 ~6 V: X" A: O# D只能说你老师比较死板
8 A+ @1 Q4 v) b. z7 @4 f( l平时包的话 转染48h收/ ~5 }- s. l2 Y  F& I+ V; C4 J* h
转染后加15ml DMEM2 d* E- u3 M- U2 m7 T, \, I
收的时候能收14ml
2 x" M8 R! |4 B7 D) S% k分装1ml/每管+ x- @* Y4 ~: S) w6 L; G) a
-80保存0 V, \; h6 l3 k) P" l
半年以上
0 H: w" ~+ u1 J1 _! F  C: z2 k4 s感染10cm dish 只用1ml病毒 0 ?* J$ Y; M8 U% S7 F; U" M
puro筛时 感染效率90%以上

tianlanghehb

72h收是没有问题的，保存一般都是放-80度。

yangpan521

我们这一师兄将病毒液放入了 -80度，被老师骂了一顿，老师说病毒液不能存放，应现收先用。如果细胞没备好，就把病毒液扔了 。请求说法

刘森泉

谢谢各位哈。

lemma710

48h 72h收病毒，分开放，等测了滴度在决定要不要混起来。9 U7 K2 `2 F0 e+ C& O
病毒你可以先收了，放在4度，一两天是没有问题的，以后放最好分装放在-80。
( g2 \7 H; v% n- Y2 L$ N-80是会降低一些病毒活性的，但长时间放4度降低的更多的~

shylook

状态都会不好的- F/ I/ G! u; N. @
培养基黄了也不要去理会6 `9 l& _; f. K6 g$ O4 l! A7 s

' U' m3 X. {7 |一般转染之后48h收 有时也40h收
+ s; R5 R3 r# R) E$ O9 V  N4 w很多protocol24h  48h分别收一次  r- |  {) r8 v& t8 {

( C4 L  y$ T: K1 s0 J个人觉得48h收足够" O  R3 C' q$ J
& k* f* {- ]9 g
你可以冻起来（分装）也可以放4度几天再测滴度
$ u* \2 q2 H: _/ V! y+ S2 t4 W本人是分装-80