关于PEG8000的配制问题

huangcong1988

不知道40%的PEG8000怎么配制，有的说是直接用去离子水配，也有说用去离子水配后加氯化镁，到底是怎么配制呢？而且PEG8000是用来浓缩核酸的么？

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huangcong1988

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, \/ }0 r7 \5 X) T) Z  s7 Y  U3 }4 |4 g; U' Q
文章中好像是收集慢病毒的过程吧，当然高速离心能在一定程度上提高慢病毒滴度，但是浓缩。。。

huangcong1988

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0 f( T' z: m5 }* S9 w) p) W& P/ n' s9 p. D) `5 n
非常感谢！我是为了浓缩慢病毒

john7812x

回复 huangcong1988 的帖子- `- o/ J0 a$ t% X8 [4 ~- j8 s

6 Z! ~- Y; r; d; h3 G2 h你是不是打算浓缩Lentivirus，来提高它的滴度, 为下步感染实验做准备?
4 q* Y: E; x1 m0 s1 U+ ?* y8 \还是要浓缩Lentivirus 的RNA？7 }9 @9 _1 C: ^) n
  N3 k/ E( I  ^& j
若是为了提高病毒滴度可以超速离心的方法：% [% B& w( u  W4 `

1 e7 P- `0 ~% a* m* `$ r3 {2 [若是为了浓缩RNA，可以冷冻干燥，或沉淀RNA后再溶解，等等。
' P& c: n& A$ N! S8 D$ L! U
* K8 Y% b! R3 r! f7 V7 o补充内容 (2011-11-1 19:54):9 K! [+ p# F) n9 `  \# |
在这个超速离心的protocol 里用的是sucrose, 没有用PEG，可能和你实验室计划不同。

huangcong1988

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4 r% [& F- ^" W* v
) A. C( ^5 n" c* x- y有道理，慢病毒上清要纯化的话呢？慢病毒是RNA+外壳（蛋白），那去离子水是应该用DEPC水处理一下

huangcong1988

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$ L9 c1 ?3 X+ s
4 F  X; U6 V" H& t8 Y2 T( a不是提RNA，是浓缩，就是已经收集的慢病毒上清，想用PEG8000纯化一下，谢谢

john7812x

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& k2 `; c* ~4 @9 ^4 G/ W# {! Y$ O" b
PEG8000可以纯化RNA，如网页中所述：http://www.protocol-online.org/biology-forums/posts/16186.html) B9 n4 D. W% O% _7 `
但是，我没有用过PEG8000提取RNA，我用试剂盒提取小量RNA，或用Trizol提取大量RNA。/ k# m8 D9 q6 f9 M3 ?
0 i! _( y2 [4 Y( s0 c  d( G- l
40%（w/v）PEG8000 用去离子水配，如文件中黄色部分所示：7 k+ Y, H0 n* R* _" y/ b
; C& g  a, O1 @0 G
- O4 ?3 ?: J9 T' U6 O
假如你打算用PEG8000 提取RNA，建议用DEFC处理过的去离子水来配制。

huangcong1988

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6 x2 b6 M  F, c" }. w8 B5 i7 F* i4 M2 n/ `
是，PEG也用于细胞融合