成年小鼠成纤维细胞培养

超级小葵

新手。现在在做成年小鼠尾尖的成纤维细胞培养，今天是第8天，剪碎后用15%FBS的DMEM培养基培养，到第4天的时候长出来这些东西，跟文献网络上描述的成纤维细胞形态不一样，想请教高手看一下，这是什么细胞！非常感谢。

yanjie11678

应该不是细胞，成体组织块培养细胞应该不会这么快迁出。看你照的照片这些东西和组织块好像不在一个面上啊。

超级小葵

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! \! z2 ?4 S& e: }% g9 N; k  B( L; x6 @" V$ J
错了，这图是第六天照的，如果这不是细胞，那是什么呢？为什么说组织和细胞不在一个面上，组织本来剪的不是很小

jhu132llh

1.细胞形态不对，请确定焦距没问题，有点疑似对焦不在细胞层面的问题/ B/ l! p2 ~, A5 ]* {
2.成纤维细胞将会在3天内大量游离，3天左右将会生长到汇合度50-70%，尤其是组织块周围将会及其密集。
4 q7 @5 U7 B! e3.组织培养在培养前期（前2天）请小心少动，过多移动组织皿将影响组织块的贴壁，组织块的贴壁情况直接影响细胞游离生长。

song58

话说怎么感觉有点点像keratinocyte ...

yanjie11678

其它组织块周围也有这样的东西吗？是不是你照相时调焦距的问题？我看组织块的边缘很模糊，怀疑这些东西不在细胞层面上。

超级小葵

jhu132llh 发表于 2011-11-16 16:59
9 Z1 e; v) I& S2 a2 ^, V1.细胞形态不对，请确定焦距没问题，有点疑似对焦不在细胞层面的问题$ O; X4 D: Y3 D: G3 ]- [( Z
2.成纤维细胞将会在3天内大量游离，3 ...

. b# u0 H9 w. \! P8 r" Z' k9 a# t* c我的培养方法应该没问题吧
& P8 M. o# B" `  u0 q小鼠尾尖，剪碎后，在培养箱放半个小时左右，让其贴壁，然后加入培养基（15%FBS+DMEM+1%双抗）
' C) [" F$ M0 n我每天都拿出来观察，组织贴壁不是太牢

超级小葵

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3 d5 f5 Y. U3 F, S
, ^* `' y! [+ j, m# ~' Z6 Y  S难道不是因为组织块比较大的原因吗？

超级小葵

:'(生气啊

jhu132llh

回复 超级小葵 的帖子6 t/ v- ?4 E( I
7 M# Y* H4 h3 ~+ A- H0 b. q
掏老窝子技巧，个人尝试好多方法后总结出来的，你可以试试+ |1 q1 M) _& O+ s# B* ]
1.可以这样，先加一点培养基，在培养皿中晃一晃让培养液均匀铺在皿底，然后加入组织块，培养$ l, {8 Z  ^; ^8 n/ y3 s
2.6-8小时后沿边缘极其缓慢加入剩余培养液1 ]; n: m4 X- X0 g  a9 B; ?
3.2天不动它
7 B# W) R* G% ~' N4.这个是总我结了很久的较难培养的组织培养的组织培养技巧，大部分的难培养的组织培养都高效，希望对你有效