提过组蛋白的请进

xujie158

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1 ]: J8 [- ^# l因为第一次提组蛋白histone，有些问题需要跟大家请教一下。
8 v2 L% l6 B& D我提完组蛋白，跑了一个SDS-Tris-glycine胶，然后用考马斯亮蓝染色，现在H3、H2B、H2A、H4位置都与其大小相符，唯独H1大小不符，正常约21-22（根据pubmed上公布氨基酸序列计算得到），但从图上看应该在30-32左右，而且是两条带，我又查阅了文献，Nature protocol上的一篇文章显示，其胶图与我的结果一致。
- B2 J5 \4 Q. P: V我的条带图
/ G7 ?& E3 [) p: N- B

2011-11-25 08:54 上传

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5 `% F2 |" _5 S6 U; k- F( c
Nature中的条带图) ^& \! f1 E8 `2 R# \; r/ E; J, f

2011-11-25 08:53 上传

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# t0 ^9 f, B  P; S, J; q& b+ q现在是请问谁能给我解释一下原因啊？" E. m! u4 Z; k% h# z( x3 U
我想知道比较确定的回答，如果是回答诸如是不是有修饰啊？是不是有几种不同的type啊？就麻烦大家发个“顶”顶一下就好了，当然如果能够给出具体的原因另当别论。

xujie158

回复 shiyi 的帖子! S; X1 H9 }% z* s& C# Z" G
. F7 x$ h+ E1 k+ v' U
我查过几篇文献了，结果都是在那个位置，而且都是两条带，现在就是不确定里面具体的原因是什么。

xujie158

回复 eley 的帖子
. R  k  b/ q: J$ C0 _/ r! v7 \
& `+ ~5 i, I& ~; M9 Y! k$ D5 [/ x( a已经解决，其实我知道是由于过度修饰造成的，因为只有这样的解释更加合理，但是却一直找不到合适的文献作为支撑，所以请教做过实验的人给出直接的原因，现在已经查到相关文献，附上一条
. {& n! g/ m' |

2011-11-25 11:20 上传

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/ I- d& ]0 F/ E$ n7 l% @来源blood

xujie158

谢谢大家讨论

xujie158

0 x& o3 g; M. W3 `" [1 c0 m  L2 q6 I1 k2 p$ s' Z6 M
回复 mayansen1314 的帖子. M% K, b. y  `8 b- q+ q
/ N  X5 o* y8 v4 p3 t) G
不好意思，我们是公司的，可能不能给你有效的帮助信息，因为我们所用到的western试剂都是进口试剂原装的，所以配方我们不需要管的。我感觉如果一般实验室实验的话，不会用到我们使用的试剂，因为价格都比较高，平均我们做一个板的western成本在200元以上，并不适用于高校实验室使用，如果你当真需要的话我可以把商品货号给你。& f+ Q. Q2 z4 k1 r9 C) }8 R
我们转膜的话用的是半干转，似乎也不符合你的要求。
: U' r, Y! ?; {1 X( G你可以网上搜索一下，信息很多的。