|

- 积分
- 24
- 威望
- 24
- 包包
- 93
|

这些天在做干细胞分离方法的一些汇总研究,看了很多相关的报道和文章,不过整个思路都还比较混乱,还是和大家分享分享吧,也希望一些专业同仁能给些意见。0 {# c5 o U$ y" j: t8 x
流式细胞技术分选法(FCM),利用流式细胞仪对处在快速、直线、流动状态中的单细胞或生物颗粒进行多参数、快速定量分析,同时对特定群体加以分选的现代细胞分析技术。主要仪器是美国BD公司的BD FACS Aria流式细胞分选仪。1 k3 \# T& e2 u" O; E9 L: x2 ~9 k8 w$ O
免疫磁珠法(MACS),核心是在磁珠表面包被具免疫反应性的抗体进行抗原抗体反应,在细胞表面形成玫瑰花结,这些结合了磁珠的细胞一旦置于强大的磁场下,就会与其他未被结合的细胞分群。
0 {6 n6 ?* n9 K5 j5 ~密度梯度离心法,用一定的介质在离心管内形成连续或不连续的密度梯度,将细胞混悬液或匀浆置于介质的顶部,通过重力或离心力场的作用使细胞分层、分离。
6 i7 n; G/ \* Y/ w3 t+ m: u& @负收集法,将不需要的细胞作为靶细胞用Lin抗体络合收集到一起,保留Lin阴性细胞,再用密度梯度离心法去除残留红细胞等,获得干细胞。
; d, x4 _4 }4 v2 S6 N0 P# E
j; c$ l9 \. m/ i! R5 j$ k不过还有几点疑问:4 ~" v9 r: P a6 e' U5 ], n2 f
1,如果只要用到离心机的,都应该算是离心法,包括密度梯度离心法。Ficoll、peroll、甲基纤维素、明胶、淀粉等分离液法,是不是也应该属于离心法?羟乙基淀粉沉降法,如果用离心机离心(我看有的试验用离心有的没用),那是不是也是属于离心法?这么说来,负收集法也是一种离心法?
! P3 F! Z- B# I如果这样的话,分类应该变成FCM、MACS和离心法,离心法下分分离液法、沉降法、负收集法。
) R2 C" g) ?- l5 \- d- i9 o2,国内开始引进自动化系统分离干细胞,AXP和Sepax,经常和人工的技术作比较,这两种自动化系统,都是离心法么,都用什么试剂么?
# l) W2 e E% G0 { P0 z0 }3,目前临床是用的较多的,有没有人知道都是用什么方法?" _/ [% w% f: Z
! }. K1 O# K7 }3 j8 K肯定有很多说的不对的地方,大家见笑了,多多指导! |
-
总评分: 威望 + 5
包包 + 20
查看全部评分
|