脐带间充质干细胞分离和培养问题

tkpss18

大家好，我想请问一下有关这两个组织的培养问题。
# X0 y1 q' L% [$ `  e4 N+ ^4 m我们现在是利用组织平布法来培养脐带间充质干细胞的，我们一般要等大概7-8才会有细胞爬出来。然后我们发现也不是每一块组织碎片也会有细胞爬出来，大概是每10块有2块是有细胞爬出来的。而且细胞爬出来以后生长速度也比较慢。我们用的培养基是15%PBS+84%DMEM+1% L-Glutamine+50ul Gentamicin. 我们是在第6天换第一次液，然后每4天换一次，我想问一下大家是多久换液一次的？然后你们一般会等多久才把组织块从培养皿上去掉？+ L" h, J, H+ F2 c

都市青蛙

15%PBS+84%DMEM+1% L-Glutamine+50ul Gentamicin？？？？+ N; O2 t: _8 j3 x% j" O$ q8 F
都不用血清的呀

tkpss18

不好意思，是FBS才对。。谢谢。

leungyk

我們用DMEM/F12+10% FBS+glutamax，每3-4天換液，亦不是每塊組織都有細胞爬出來，都是大約7-9天才會有細胞見到
2 m  ]/ ?" C3 D我們亦發現StemPro+10%FBS會長得比DMEM/F12快1-2天 (如果StemPro沒加FBS，就跟DMEM/F12差不多)

漂泊的风

一般要一周才到组织块，当然也要看脐带，有的脐带爬出细胞的速度很慢，要十来天才能长满，要是具体情况而定。

tkpss18

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/ j" [' N2 B2 x) f5 ]' ~9 d那你们是有细胞爬出来就直接把组织去掉？还是会先保留组织块？如果保留组织块的话，要让细胞长到什么程度才可以把组织去掉？然后细胞爬出来以后你说是3-4天换液，那你们是半换液还是全换液了？谢谢。

tkpss18

回复 漂泊的风 的帖子* E/ i9 l$ \; {8 N" C& o
& L( ^- f+ H1 ?; {: o. m0 b2 ~; U
那长不出来的组织块，你们会怎么处理？

leungyk

tkpss18 发表于 2011-12-30 10:59 2 Z3 Z% T0 b- L! R: i! B9 f6 ]3 ?
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) h: L+ j1 K8 W! [那你们是有细胞爬出来就直接把组织去掉？还是会先保留组织块？如果保留组织块的话，要 ...

* H$ w2 ?) D( ~3 I* }7 F+ {, M
我們會保留組織塊至傳代才去掉
" _. E2 j, L. p: a6 s6 i" n" y. U是全換液的3 n+ ~, A1 R, v$ Y

tkpss18

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学习了，谢谢~

shashou_com

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一周后换液一次，保留组织。等待细胞长满整个培养瓶后才传代，去掉组织块。