几个关于全骨髓法培养MSC的细节问题

sothiskk

初次培养msc，问题比较山寨还请大家见谅。
+ S" ~0 i6 z  c4 G2 W个人用2%FBS的PBS冲洗髓腔，离心后培养基重悬。几个小问题：& G  w* D! P" B1 \( P0 q
1、冲洗髓腔时过滤掉大的团块是必要的吗，大家都过滤吗？因为我听某前辈的没有过滤，结果类似MSC形态的细胞还真都出现在贴壁的团块周围（大约72h）。
+ J9 X* W1 h7 S/ r1 ~# n, o. C2、大概和没有过滤有关，首次换液之前培养液中杂质比较多，比较混，按照以前养其他细胞的经验应该是污染了，于是就扔了。可连续两次都是这样，就硬着头皮给换了液，又过了几天生长情况还可以，也没有污染的迹象，这正常吗，各位首次换液之前的培养液是清亮的吗？
; V; c0 I# B/ m8 b3、72h第二次换液之后，还是有不少贴壁的圆形细胞，形态看起来应该是红细胞，看到别人很多图片上完全看不到贴壁的圆形细胞，请问那是多长时间以后的事儿了？

sothiskk

感谢各位的热心帮助，原来大家都是早上出来活动...

sothiskk

回复zarecol : 谢谢，是大鼠。大团块有可能是血栓，但是在冲骨髓之前就已经就形成了的，可能和我操作不太熟练，离体时间比较长有关。不知道您说的抗凝处理指什么，但我觉得这种情况加肝素应该没什么用吧。

sothiskk

回复 细胞海洋 的帖子: {# Y: l2 Z" z& L
& G" U+ F  U5 @% r' b
谢谢，这个...您把我想的也太山寨了，我是当时点了几次都让我重新登录才无奈为之...

sothiskk

回复 spchsq 的帖子/ C1 ~+ ~1 Z$ A0 C- G2 T. d* Z# e0 T

+ g* n1 `$ J: z" ?: `多谢指教...

sothiskk

回复 细胞海洋 的帖子8 v  ^! I4 H& p

" g+ O* X/ T6 u4 f; ?谢谢，现在已经正常了.

sothiskk

回复 luoziwei 的帖子! @) `8 d  m- h1 x

! g4 k9 B/ N. P. y同意。