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[讨论] 冰冻切片DAPI复染一团糟是什么原因?   [复制链接]

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金话筒 帅哥研究员 优秀会员

楼主
发表于 2012-1-14 09:08 |显示全部帖子
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我们做IF时省略去了通透的步骤,其他的步骤你的大体相似,只是固定时我们一般选用甲醇,抗体选择4度过夜或是37℃一到两个小时。
8 R5 [5 u- J: S( t3 e看你的片子,感觉像是封片剂中混进了其他东西,对焦似乎也有问题,有时候出现这种现象和切片状况也有关系,特别是组织冷冻过慢出现冰晶,很容易导致组织结构变形,染色不均。我们冷冻组织的时候,将组织包在OCT中,然后在液氮中冷冻,主要是防止那些含水量较多的组织因为缓慢冷冻在内部产生冰晶。) z9 u* f6 P; v9 q" b
另外,我们切完片子如果不立即使用,一般在-20℃或是-80℃存放。
* u9 t. {3 w0 h一点建议,仅供参考。
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