ES培养基的成分及配制

huangcong1988

最近准备配human ES 培养基，但是看了文献之后觉得头大了，因为不同文献使用的配方很大不同，所以想请教各位战友，human ES的培养基的成分，配制需要注意哪些事项，有没有使用起来很好的human ES培养基？谢谢大家

zhusealin

我们用的配方是 80% DMEM/F12   20% SR    1% NEAA    0.5% 谷氨酰胺  4ng/ml bFGF   0.1mM beta巯基乙醇

lixf

我们用的配方是 79% KODMEM   20% SR    1% NEAA    1% 谷氨酰胺  8ng/ml bFGF   0.1mM β-巯基乙醇

song58

回复 huangcong1988 的帖子* Y5 B5 \4 @3 k; j9 E9 a) q/ ~6 v
! r( a/ n  g# g' l$ J
KSR                                              Invitrogen        100 ml7 V  \" r% F; o/ J( R& g; l" f
Non-Essential Amino Acids              TMS-001-C         5 ml3 x, I% B# m  M5 R7 H
L-Glutamine Solution               TMS-002-C         5 ml
0 a/ h: Y% f$ Q7 s. v: i0 JBeta 2-Mercaptoethanol               ES-007-E        5 ml8 Y- C% y! O& M$ T+ F/ \; D
Penicillin-Streptomycin (optional )    TMS-AB2-C         5 ml
9 B+ X  \, Z0 B; o, z& w" `Fibroblast Growth Factor basic,, M# }& }- W3 I+ j4 w$ b
human recombinant              GF003        4 ng/ml
# _4 D" S& @+ nEmbryoMax® DMEM/F12              DF-042-B        Add to 500ml
4 c+ ?# v$ _3 M  B5 t+ r9 ^  L9 n0 L& N0 D* p, X
我用的配方，仅供参考" Y6 K! b' X& ^

huangcong1988

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) t0 I! t2 M5 w* T$ v
# e1 w4 _' y( _: s6 s+ F* J谢谢，我看大家配方中主要是FGF含量不同，这个影响大么？

huangcong1988

回复 song58 的帖子3 S6 e& L: A, a+ ?9 k, y  ~0 S1 i' L
& O; U9 g: {5 U/ q( Y
谢谢，那这些成分分别怎么保存呢？

huangcong1988

回复 lixf 的帖子
* h. ~5 J9 u2 h3 N% {, @
+ `! s. p# z! v! e% ^. `& t$ I谢谢，那β-巯基乙醇用过滤么？它会溶解滤器么?它是有机溶剂?

huangcong1988

回复 song58 的帖子4 i1 s3 _) {# O# J# T7 Y" J! J

# w% u; U/ H5 E& q0 f还有，问你一个问题，就是之前丝裂霉素c加PBS配了之后，颜色是淡紫色，这个正常吗？

song58

回复 huangcong1988 的帖子  Y* y' D$ _$ F% {! x$ c1 E0 I5 e
" ]* e0 |) A' S; U, J0 N( x& Z
保存的话，每个产品包装上都有注明。& }1 P) H; V6 S% I) r. p
MC应该是不用PBS溶解吧，我用培养基（10%FBS的DMEM）溶，这东西需要避光保存，新鲜配的发点紫红色，比DMEM颜色深点

lixf

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8 s6 @6 W1 ?. _5 p8 M* L
; U' f) A5 L; x* p稀释、过滤，我们过滤的时候也没见它溶解滤器呀。是有机溶剂