关于胰酶消化细胞

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最近养小鼠ES细胞，每次传代时用0.25%的胰酶消化，胰酶从4°冰箱拿出来后没有37℃预热，在超净台放到室温。感觉有时候消化的太厉害（超过3分钟），有时加培养液终止、吹匀的时候又有些贴壁没消化下来的，请教一下应该如何把握消化的时间？谢谢！

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回复 xiongjiedeng 的帖子
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6 {% e1 w8 I( F谢谢！我用的是六孔板，300ul，你说的2ml是用来消化多大的皿/孔？

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回复 safflower 的帖子& H# j( ~- m5 ~* k* B

& {  O3 b4 Q: A7 J2 `1 G: Z, [4 m谢谢！刚接触细胞培养，感觉手法对于细胞的状态有很大的影响，确实需要用心摸索！

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回复 wuyannini 的帖子( v4 z' G6 z, u) u1 S& w

) h1 N6 G5 \! C4 z, q, a嗯，我都是用PBS（六孔板每孔1ml的量）洗一遍，应该有这方面的原因，谢谢！

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回复 mirrida 的帖子8 a- i$ Y; D' ^9 r

# V( i! _2 R( s" b谢谢！但过消化是不是对于细胞状态有不好的影响？

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回复 yyshpy 的帖子( u  z5 T$ ~: C+ T5 Y4 L+ f

1 q1 f' [" b- W9 h# W谢谢！加消化液一般多长时间，可以在镜下看到你说的那种细胞状况？？

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回复 wangfang 的帖子) x# ^2 j+ c+ O) F. y1 ~

- i1 m1 Y, A0 }$ T" z* ^敲打？怎么个做法？我都是轻轻晃。

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回复 yyshpy 的帖子
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嗯，谢谢！！