关于胰酶消化细胞

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最近养小鼠ES细胞，每次传代时用0.25%的胰酶消化，胰酶从4°冰箱拿出来后没有37℃预热，在超净台放到室温。感觉有时候消化的太厉害（超过3分钟），有时加培养液终止、吹匀的时候又有些贴壁没消化下来的，请教一下应该如何把握消化的时间？谢谢！

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回复 xiongjiedeng 的帖子, ]$ D- y1 h/ J2 ^9 ~. Y

8 f' @5 i# S8 @- J  q3 U谢谢！我用的是六孔板，300ul，你说的2ml是用来消化多大的皿/孔？

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回复 safflower 的帖子
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7 C- l% ^' g. {6 }# M9 {/ b谢谢！刚接触细胞培养，感觉手法对于细胞的状态有很大的影响，确实需要用心摸索！

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回复 wuyannini 的帖子6 _, S! `# H& G
+ p6 ?5 [' D( d
嗯，我都是用PBS（六孔板每孔1ml的量）洗一遍，应该有这方面的原因，谢谢！

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回复 mirrida 的帖子
) j. y! k8 Y1 h- S# \8 x! b  _/ E6 `0 n) o5 S2 x
谢谢！但过消化是不是对于细胞状态有不好的影响？

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回复 yyshpy 的帖子+ v) y, i/ Q8 ]) `- Z

9 ^. J; C% w* s' z谢谢！加消化液一般多长时间，可以在镜下看到你说的那种细胞状况？？

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回复 wangfang 的帖子
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敲打？怎么个做法？我都是轻轻晃。

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回复 yyshpy 的帖子
( p: m% U) Y9 ?% D" ?9 [% N5 A" t8 [+ ?1 d9 O5 n) h* e' X) d
嗯，谢谢！！