关于干细胞成软骨的问题

wuyannini

我看到有的文献报道关于成软骨培养基的配制只这样的：
! A7 `( f" L/ E$ G8 F1 i成软骨诱导：7 ^; D8 g. H6 u0 P- {
DMEM-HG 10FBS
' _) y/ w2 R5 t9 n3 g7 {' _6 \. n脯氨酸（proline）                      4mM7 u' b8 l: g, e9 K( Y$ |. O( _
抗坏血酸维生素C （ascorbic acid）       50ug/ml      * C8 ~4 O3 J+ w. m& v
ITS-Premix                                                 1% : w1 G+ P7 z: ^
丙酮酸钠（sodium pyruvate）           1 mM1 S$ ]; V; K. N4 H+ ^4 ^
地塞米松（dexamethasone）            0.1um4 }" O. M/ n( x6 f3 \2 I
TGFβ3                                                        10 ng/mL
2 U& Z6 [2 D+ w4 V) i请问有经验的大侠，脯氨酸是L还是D，还是都可以？ITS-Premix是什么？这些试剂哪个厂家的比较好？谢谢啦/ J! _+ B1 d% `, R4 x
另外，染色液的配制及染色方法也麻烦赐教。  5 J0 E6 P" }0 y7 G; w- M
不要随便粘贴过来啊，要已经成功的经验啊。非常感谢啦！

wangzhiqi86

看来你是第一次做软骨诱导了，ITS是无血清添加剂，分别是胰岛素（insulin）、转铁蛋白（transferrin）和亚硒酸（selenious acid），+premix里面还有BSA和亚油酸，你可以看看BD的，proline是L-型。0 F0 ]3 O+ c( B2 C
再有，软骨诱导时不要加血清的，不知道你是从哪里看到的文献。# C; |& v2 {; C
软骨诱导有很多种，一般是番红O、甲苯胺蓝和阿利新蓝染色，这个鉴定ECM的aggrecan，具体步骤你可以上网查。还可以用免疫荧光和免疫组化来染色鉴定II型胶原。

wangzhiqi86

看来你是第一次做软骨诱导了，ITS是无血清添加剂，分别是胰岛素（insulin）、转铁蛋白（transferrin）和亚硒酸（selenious acid），+premix里面还有BSA和亚油酸，你可以看看BD的，proline是L-型。" v/ }5 k: R% I4 s
再有，软骨诱导时不要加血清的，不知道你是从哪里看到的文献。* r0 Y$ @- m/ h/ D$ Z8 m. {# j3 [
软骨诱导有很多种，一般是番红O、甲苯胺蓝和阿利新蓝染色，这个鉴定ECM的aggrecan，具体步骤你可以上网查。还可以用免疫荧光和免疫组化来染色鉴定II型胶原。

wuyannini

非常感谢！