关于饲养层细胞制作

yuhaoze

这两天正忙活小鼠MEF细胞，在 懵懂干细胞 的大力帮助下，终于建立起4批了。但其中有2只老鼠并没有严格按照12.5-14.5天的教科书式的实验步骤，而是请养动物的师傅按照肚子大小来粗略估计的。
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/ Y% G+ [- p  D  e' v- w- i: K& Q有一直孕鼠肚子里的3只胚胎，都非常大了， 胳膊腿都不太好往下拽，后背的皮肤还有点儿硬邦邦的，我还看到白色的类似骨头的东西，消化完了放到培养瓶，8小时之后观察，有很多细胞死的，比发育程度小的胚胎死得多很多，但也有部分细胞贴壁了，也在生长分裂，形态与MEF很相似。- @: H/ a! d6 t" \
我有一个问题，为什么必须要12.5-14.5天的，有没有相关的文献，或者前辈们有没有经验，那些用非12.5-14.5天胚鼠建立起来的饲养层细胞，对ips或ES的生长有没有不良的影响？% q# Z  g$ S$ Q. w6 {0 X
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补充内容 (2012-3-5 16:18):
" @: \8 Y$ j. Z2 a; y还有一个问题，就是MEF经过MMC处理之后停止分裂，会一直贴在哪里不死吗？最后MEF就怎样了？ 谢谢！2 K6 A" c6 F7 V1 g7 H8 A: l4 E
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补充内容 (2012-3-5 16:18):4 Q9 \$ S- _; ~  A( G4 z, u1 k" |
还有一个问题，就是MEF经过MMC处理之后停止分裂，会一直贴在哪里不死吗？最后MEF就怎样了？ 谢谢！) Y3 J: V# }2 n% k( S: \& e
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补充内容 (2012-3-5 16:18):
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" R: p6 E: i/ C7 P: M补充内容 (2012-3-5 16:18):4 X1 ~7 o# O% }+ f0 L& l. B
还有一个问题，就是MEF经过MMC处理之后停止分裂，会一直贴在哪里不死吗？最后MEF就怎样了？ 谢谢！
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补充内容 (2012-3-5 16:18):
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7 Y0 d0 \: P3 B7 z8 \9 w, m" F还有一个问题，就是MEF经过MMC处理之后停止分裂，会一直贴在哪里不死吗？最后MEF就怎样了？ 谢谢！

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回复 receiver1 的帖子# _* k; ^2 }) l: h0 n" A

8 k8 I& X. q4 r1 g% E) P" [你消化的时候一般消化多长时间？

mansnoopy

回复 yuhaoze 的帖子4 t( N8 h' t; R7 A/ q
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feeder你不用怎么担心，3,4天内是没有问题的，再以后就会逐渐死亡

laurel101

回复 yuhaoze 的帖子
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. ?1 D& M2 h& k" T: j+ z4 @1 T- `小鼠胚胎很容易剪的，我就把它们放100mm的dish,用眼科弯剪剪的。

yuhaoze

回复 laurel101 的帖子
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想问一下，您是用什么方法将小鼠剪碎的，容器是啥， 我用眼科剪子和青霉素小瓶子，不过论坛里有人批评说这样不太好

yuhaoze

回复 南宫燚岚 的帖子! _& g2 m4 y5 K/ ~5 k7 {% J2 S

( u: Y: W0 ]. c8 K谢谢！ 还是保护一下比较好！

yuhaoze

回复 laurel101 的帖子
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6 n, A" g# j+ \! n+ `! O9 h3 A" D5 E谢谢！

yuhaoze

回复 hanwei0610 的帖子
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谢谢！

laurel101

回复 573639471 的帖子) H1 }2 a, `$ B, [
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上海斯莱克就有卖的

南宫燚岚

回复 xiangchou812 的帖子
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戴手套操作我觉得这是一个无可争辩的事实，不需要争论！既保护自己，又避免样品污染。不能为了省一点小钱而影响实验。