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关于饲养层细胞制作     [复制链接]

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发表于 2012-3-5 15:51 |只看该作者 |正序浏览 |打印
这两天正忙活小鼠MEF细胞,在 懵懂干细胞 的大力帮助下,终于建立起4批了。但其中有2只老鼠并没有严格按照12.5-14.5天的教科书式的实验步骤,而是请养动物的师傅按照肚子大小来粗略估计的。8 j" w; v& p8 E0 v  {: m

; C2 i7 x* z; N$ R有一直孕鼠肚子里的3只胚胎,都非常大了, 胳膊腿都不太好往下拽,后背的皮肤还有点儿硬邦邦的,我还看到白色的类似骨头的东西,消化完了放到培养瓶,8小时之后观察,有很多细胞死的,比发育程度小的胚胎死得多很多,但也有部分细胞贴壁了,也在生长分裂,形态与MEF很相似。' u! E0 x. l6 x3 \
我有一个问题,为什么必须要12.5-14.5天的,有没有相关的文献,或者前辈们有没有经验,那些用非12.5-14.5天胚鼠建立起来的饲养层细胞,对ips或ES的生长有没有不良的影响?
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补充内容 (2012-3-5 16:18):; r! D2 f, M+ s8 j, _( U6 @
还有一个问题,就是MEF经过MMC处理之后停止分裂,会一直贴在哪里不死吗?最后MEF就怎样了? 谢谢!; f. s% W! z! g9 N* P$ }
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补充内容 (2012-3-5 16:18):. U" O- Q7 ^% d0 E/ Y
还有一个问题,就是MEF经过MMC处理之后停止分裂,会一直贴在哪里不死吗?最后MEF就怎样了? 谢谢!
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补充内容 (2012-3-5 16:18):1 F( Z! w1 v  o
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补充内容 (2012-3-5 16:18):' `$ n1 Y7 X% ~7 C/ n3 l( c! v7 |
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补充内容 (2012-3-5 16:18):2 v, B% G" e5 v( U4 F
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发表于 2012-3-12 08:07 |只看该作者
回复 receiver1 的帖子, C6 q: \* O5 b, E
& h+ w8 L# m: h1 H8 X' W* r
你消化的时候一般消化多长时间?
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发表于 2012-3-9 21:53 |只看该作者
回复 yuhaoze 的帖子) n' U: J9 q! ~* I

" F7 l* f1 X- i8 M5 a9 O2 tfeeder你不用怎么担心,3,4天内是没有问题的,再以后就会逐渐死亡
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发表于 2012-3-7 09:00 |只看该作者
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回复 yuhaoze 的帖子; W: h" @2 N, T( M

+ f2 Q; F+ y, a4 Z* s# _小鼠胚胎很容易剪的,我就把它们放100mm的dish,用眼科弯剪剪的。
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发表于 2012-3-7 08:13 |只看该作者
回复 laurel101 的帖子
$ k4 _. `) K+ U2 n6 Y
2 r% b' q' Q. l4 K; \* V想问一下,您是用什么方法将小鼠剪碎的,容器是啥, 我用眼科剪子和青霉素小瓶子,不过论坛里有人批评说这样不太好
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发表于 2012-3-7 08:10 |只看该作者
回复 南宫燚岚 的帖子
, v* r9 r/ F+ i  l: j% x( m' h; G4 v! A, b' T! q0 R& _) Q; g
谢谢! 还是保护一下比较好!

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发表于 2012-3-7 08:10 |只看该作者
回复 laurel101 的帖子
0 a& R7 w$ G7 J! q4 H8 W
. d" z* [2 K4 |谢谢!

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发表于 2012-3-7 08:09 |只看该作者
回复 hanwei0610 的帖子
8 j! M& X! n2 X3 W
# X; Q4 j* l0 m1 R+ a谢谢!

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发表于 2012-3-6 12:12 |只看该作者
回复 573639471 的帖子/ O! |, y  u, U7 J7 }) R
1 Q3 ?8 ?) r$ S) e: `) `: h1 R
上海斯莱克就有卖的

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发表于 2012-3-6 09:48 |只看该作者
回复 xiangchou812 的帖子: G' o3 `+ _* A1 P3 ~" @1 ~6 I
8 l: j- M! M1 x6 G
戴手套操作我觉得这是一个无可争辩的事实,不需要争论!既保护自己,又避免样品污染。不能为了省一点小钱而影响实验。
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